3,3'-Dihexyloxacarbocyanine iodide (DiOC6(3) iodide)
(Synonyms: 碘代3,3'-二己氧基羰花青,DiOC6(3) iodide) 目录号 : GC33493
A fluorescent dye
Cas No.:53213-82-4
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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3,3'-Dihexyloxacarbocyanine (DiOC6(3)) is a lipophilic fluorescent dye with excitation/emission spectra of 484/501 nm, respectively.1 At high concentrations, DiOC6(3) accumulates in the endoplasmic reticulum (ER) and has been used to visualize ER in moss, yeast, and muscle cells. At low concentrations, DiOC6(3) accumulates in mitochondria and has been used to assess mitochondrial dislocations, fusion, and fission in living cells, as well as to visualize cellular apoptosis. DiOC6(3) can also be used to assess cell membrane potential, as depolarization directly correlates with increased fluorescence.2,3 DiOC6(3) photoexcitation inactivates intracellular organelle movement and inhibits microtubule polymerization in vitro.4
1.Sabnis, R.W., Deligeorgiev, T.G., Jachak, M.N., et al.DiOC6(3): A useful dye for staining the endoplasmic reticulumBiotech. Histochem.72(5)253-258(1997) 2.Jenssen, H.-L., Redmann, K., and Mix, E.Flow cytometric estimation of transmembrane potential of macrophages--a comparison with microelectrode measurementsCytometry7(4)339-346(1986) 3.Hoffman, J.F., and Laris, P.C.Determination of membrane potentials in human and Amphiuma red blood cells by means of fluorescent probeJ. Physiol.239(3)519-552(1974) 4.Lee, C., Wu, S.S., and Chen, L.B.Photosensitization by 3,3'-dihexyloxacarbocyanine iodide: specific disruption of microtubules and inactivation of organelle motilityCancer Res.55(10)2063-2069(1995)
本方案仅提供一个指导，请根据您的具体需要进行修改。
1.制备染色液
(1)配置DMSO储存液:使用DMSO溶解DiOC6(3) iodide，配置浓度为1~5mM的储存液。
注意:未使用的储存液分装后在-20℃避光保存，避免反复冻融。
(2)配置工作液:用合适的缓冲液(如:无血清培养基或PBS)稀释储存液，配制浓度为0.5~5μM的工作液。
注意:请根据实际情况调整工作液浓度，现用现配。
2.细胞悬浮染色
(1)悬浮细胞：经4°C、1000g离心3-5分钟，弃去上清液，用PBS清洗两次，每次5分钟。
(2)贴壁细胞：使用PBS清洗两次，加入胰酶消化细胞，消化完成后经1000g离心3-5min。
(3)加入1mL的DiOC6(3) iodide工作溶液重悬约106个细胞，室温避光孵育5-30分钟。不同细胞最佳孵育时间不同，请根据具体实验需求自行摸索。
(4)孵育结束后，经1000g离心5分钟，去除上清液，加入PBS清洗2-3次，每次5分钟。
(5)用预温的无血清细胞培养基或PBS重悬细胞。通过荧光显微镜或流式细胞术观察。
3.细胞贴壁染色
(1)在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。
(2)从培养基中移走盖玻片，吸出过量的培养基，将盖玻片放在潮湿的环境中。
(3)从盖玻片的一角加入100μL的染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
(4)室温避光孵育5-30分钟。不同细胞最佳孵育时间不同，请根据具体实验需求自行摸索。
(5)孵育结束后吸弃染料工作液，使用预温的培养液清洗盖玻片2~3次。
4.显微镜检测：DiOC6(3) iodide的最大激发光/发射光分别为484/501 nm。
注意事项：
1）荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
| Cas No. | 53213-82-4 | SDF | |
| 别名 | 碘代3,3'-二己氧基羰花青,DiOC6(3) iodide | ||
| Canonical SMILES | CCCCCCN1/C(OC2=CC=CC=C12)=C/C=C/C3=[N+](CCCCCC)C4=CC=CC=C4O3.[I-] | ||
| 分子式 | C29H37IN2O2 | 分子量 | 572.52 |
| 溶解度 | DMSO : ≥ 125 mg/mL (218.33 mM);Water : < 0.1 mg/mL (insoluble) | 储存条件 | Store at 2-8°C, protect from light |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
||
| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.7467 mL | 8.7333 mL | 17.4666 mL |
| 5 mM | 0.3493 mL | 1.7467 mL | 3.4933 mL |
| 10 mM | 0.1747 mL | 0.8733 mL | 1.7467 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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