4-MUNANA (sodium salt)
(Synonyms: N-乙酰基-2-O-(4-甲基-2-氧代-2H-1-苯并吡喃-7-基)-ALPHA-神经氨酸一钠盐, 4-Methylumbelliferyl-N-acetyl-α-D-Neuraminic Acid) 目录号 : GC424484-MUNANA (sodium salt)是一种用于神经氨酸酶活性测定的荧光底物。4-MUNANA被酶水解时,会释放出荧光团4-甲基伞形酮(4-MU),4-MU的最大激发波长为365nm,最大发射波长为450nm。
Cas No.:76204-02-9
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
Quality Control & SDS
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- Purity: >98.00%
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本方案仅提供一个指导,请根据您的具体需要进行修改。
1. 溶液配制
(1)储存液:将低温保存的固体平衡至室温,使用实验缓冲液溶解4-MUNANA,配置1mM的储存液。
注意:未使用的储存液分装后在-20℃或-80°C避光保存,避免反复冻融。
(2)工作液:用实验缓冲液稀释储存液,到所需的工作浓度,例如:100μM。
注意:最佳的工作浓度请根据实际情况调整或参阅文献自行设置梯度浓度进行摸索。工作液必须现配现用。
2.用4-MUNANA测定神经氨酸酶活性[1](来自文献,仅做参考)
(1)将5µg总细胞蛋白与30µL 4-MUNANA(终浓度为100µM)混合于96孔板中,在37 °C下孵育1h。
(2)添加150μL 0.14M NaOH(溶于83%乙醇中)溶液来终止反应。
(3)用多功能微孔板读数仪分别在365nm和450nm处测定荧光信号值。
3.用4-MUNANA测定唾液酸酶活性[2](来自文献,仅做参考)
(1)细胞悬浮于测定缓冲液(20mM 柠檬酸盐(pH 4.5)、60mM NaCl和1mM MgCl2)中,通过超声处理裂解。
(2)将2μg细胞裂解物加入到100μL测定缓冲液中(含有100μM 4-MUNANA),在37 °C下孵育4h。
(3)添加50μL 0.1M甘氨酸-NaOH(pH 10.5)缓冲液来终止反应。
(4)用多功能微孔板读数仪分别在365nm和450nm处测定荧光信号值。
注意:该实验方案为使用4-MUNANA测定神经氨酸酶活性和唾液酸酶活性提供指导。可以根据其他文献和具体实验要求进行调整。
References:
[1]Naik N G, Lo Y W, Wu T Y, et al. Baculovirus as an efficient vector for gene delivery into mosquitoes[J]. Scientific reports, 2018, 8(1): 17778.
[2]Seol B, Kim Y D, Cho Y S. Modeling sialidosis with neural precursor cells derived from patient-derived induced pluripotent stem cells[J]. International Journal of Molecular Sciences, 2021, 22(9): 4386.
4-MUNANA (sodium salt) is a fluorescent substrate for neuraminidase activity assays[1]. When 4-MUNANA is hydrolyzed by the enzyme, it releases the fluorophore 4-methylumbelliferyl (4-MU), which has an excitation maximum at 365nm and an emission maximum at 450nm[2, 3]. 4-MUNANA can be used to quantify neuraminidase activity in mammalian cells and clinical isolates of influenza virus[4]. 4-MUNANA can be used to assay sialidase activity[5].
References:
[1]Feng C, Li J, Snyder G, et al. Antibody against microbial neuraminidases recognizes human sialidase 3 (NEU3): the neuraminidase/sialidase superfamily revisited[J]. MBio, 2017, 8(3): 10.1128/mbio. 00078-17.
[2] Singleton E V, Gates C J, David S C, et al. Enhanced immunogenicity of a whole-inactivated influenza A virus vaccine using optimised irradiation conditions[J]. Frontiers in Immunology, 2021, 12: 761632.
[3]Naik N G, Lo Y W, Wu T Y, et al. Baculovirus as an efficient vector for gene delivery into mosquitoes[J]. Scientific reports, 2018, 8(1): 17778.
[4] Wetherall N T, Trivedi T, Zeller J, et al. Evaluation of neuraminidase enzyme assays using different substrates to measure susceptibility of influenza virus clinical isolates to neuraminidase inhibitors: report of the neuraminidase inhibitor susceptibility network[J]. Journal of Clinical Microbiology, 2003, 41(2): 742-750.
[5] Seol B, Kim Y D, Cho Y S. Modeling sialidosis with neural precursor cells derived from patient-derived induced pluripotent stem cells[J]. International Journal of Molecular Sciences, 2021, 22(9): 4386.
4-MUNANA (sodium salt)是一种用于神经氨酸酶活性测定的荧光底物[1]。4-MUNANA被酶水解时,会释放出荧光团4-甲基伞形酮(4-MU),4-MU的最大激发波长为365nm,最大发射波长为450nm[2, 3]。4-MUNANA能够用于定量哺乳动物细胞和流感病毒临床分离株中的神经氨酸酶活性[4]。4-MUNANA能够用于唾液酸酶活性测定[5]。
Cas No. | 76204-02-9 | SDF | |
别名 | N-乙酰基-2-O-(4-甲基-2-氧代-2H-1-苯并吡喃-7-基)-ALPHA-神经氨酸一钠盐, 4-Methylumbelliferyl-N-acetyl-α-D-Neuraminic Acid | ||
Canonical SMILES | O=C1C=C(C)C2=CC=C(O[C@]3(C([O-])=O)C[C@H](O)[C@@H](NC(C)=O)[C@@]([C@H](O)[C@H](O)CO)([H])O3)C=C2O1.[Na+] | ||
分子式 | C21H24NO11•Na | 分子量 | 489.4 |
溶解度 | DMF: 15 mg/ml,DMSO: 20 mg/ml,Ethanol: 0.25 mg/ml,PBS (pH 7.2): 10 mg/ml | 储存条件 | Store at -20°C, protect from light |
General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限:-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度,请将管子加热至37℃,然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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Shipping Condition | 评估样品解决方案:配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸:配备RT,或根据请求配备蓝冰。 |
制备储备液 | |||
1 mg | 5 mg | 10 mg | |
1 mM | 2.0433 mL | 10.2166 mL | 20.4332 mL |
5 mM | 0.4087 mL | 2.0433 mL | 4.0866 mL |
10 mM | 0.2043 mL | 1.0217 mL | 2.0433 mL |
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量) | ||||||||||
给药剂量 | mg/kg | 动物平均体重 | g | 每只动物给药体积 | ul | 动物数量 | 只 | |||
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方) | ||||||||||
% DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
计算重置 |
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL saline,混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的;
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。