Acridinium NHS ester
(Synonyms: 吖啶C2NHS酯) 目录号 : GC42711
Acridinium NHS ester (AE NHS)能够用于标记蛋白质和核酸上的伯胺，经过过氧化氢（H2O2）反应产生化学发光。
Cas No.:177332-37-5
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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Acridinium NHS ester (AE NHS) is a protein and nucleic acid label at primary amines in biomolecules and produce chemiluminescence in the presence of hydrogen peroxide (H2O2)[1] [2].
Acridinium NHS ester is applied in DNA labeling ex vitro(such as 2.95mmol/L, 30min, 37°C)[3], and protein labeling ex vitro (such as 10μM)[4]. Acridinium NHS ester–labeled antibody is also applied in microRNA detection[5], and viral genome of SARS-CoV-2[6].
References:
[1] Arnold, L J Jr et al. “Assay formats involving acridinium-ester-labeled DNA probes.” *Clinical chemistry* vol. 35,8 (1989): 1588-94.
[2] Natrajan, Anand, David Wen, and David Sharpe. "Synthesis and properties of chemiluminescent acridinium ester labels with fluorous tags." *Organic & Biomolecular Chemistry* 12.23 (2014): 3887-3901.
[3] He, Yi et al. “DNA sensor by using electrochemiluminescence of acridinium ester initiated by tripropylamine.” *Analytical and bioanalytical chemistry* vol. 399,10 (2011): 3451-8. doi:10.1007/s00216-010-4157-y
[4] Lai, Yongquan et al. “Using acridinium ester as the sonochemiluminescent probe for labeling of protein.” *The Analyst* vol. 134,1 (2009): 131-7. doi:10.1039/b813330a
[5] Kappel, Andreas et al. “MicroRNA in vitro diagnostics using immunoassay analyzers.” *Clinical chemistry* vol. 61,4 (2015): 600-7. doi:10.1373/clinchem.2014.232165
[6]Pham, Jimmykim et al. “Performance Characteristics of a High-Throughput Automated Transcription-Mediated Amplification Test for SARS-CoV-2 Detection.” *Journal of clinical microbiology* vol. 58,10 e01669-20. 22 Sep. 2020, doi:10.1128/JCM.01669-20
Acridinium NHS ester (AE NHS)能够用于标记蛋白质和核酸上的伯胺，经过过氧化氢（H2O2）反应产生化学发光[1] [2]。
Acridinium NHS酯用于DNA体外标记（如2.95mmol/L, 30min, 37°C）[3]，蛋白质体外标记（如1*10-5 mol/L）[4]。Acridinium NHS酯标记抗体也用于检测microRNA[5]和SARS-CoV-2病毒基因组[6]。
Acridinium NHS ester标记蛋白质的方案（本方案来自文献，请根据您的具体需要进行修改）[1]：
1.Acridinium NHS ester的超声分解：
1.1Acridinium NHS ester检测储存液：使用无水DMF溶解Acridinium NHS ester，配置浓度为1-5mg/ml的储存液，分装后在-20℃或-80℃避光保存 。
1.2制备检测液：使用DMF与H2O体积比为2:3的混合物稀释检测储存液，配置成8mL含10μM（0.01mM）Acridinium NHS ester的检测液。
1.3超声照射Acridinium NHS ester溶液15s，然后将16ml 1mol/L氢氧化钠转移到溶液中，再进行超声照射。
1.4超声照射1min，确保反应完全。
2.声致化学发光（SCL）的测量：
2.1所有SCL测量均在以下条件下进行：超声输出功率300W，频率20kHz；光电倍增管工作电压为850V。
2.2所有SCL实验均在装有光学平窗的玻璃池中进行。
2.3超声溶液应达到空气饱和状态，超声溶液体积为8mL。
2.4采用渗透性为440nm的滤光片来降低溶剂产生的背景SL强度。
2.5超声产生的溶液温度变化对SCL强度影响较小，不需要使用恒温装置。
3.标记抗体的制备：
3.1标记储存液：在DMSO中配置Acridinium NHS ester储存液，如0.5-2mM。
注意：请根据实际情况调整储存液及工作液体的浓度。未使用的储存液建议分装后在-20℃或-80℃避光保存。
3.2将含有50mL标记缓冲液的30mg抗体溶液转移至棕色小塑料试管中，然后加入5mL 0.5mM Acridinium NHS ester*。
3.3室温搅拌1.5h。
3.4透析去除多余的Acridinium NHS ester标签，在0.1mol/L NaH2PO3里4℃透析10h。
3.5将混合物转移到透析袋中，然后将透析袋放入装有100mL透析液缓冲液的玻璃烧杯中。
3.6在4℃下纯化10h，重复3次，使ae偶联的多克隆抗体中未偶联的Acridinium NHS ester完全去除。
3.7收集50mL ae偶联物，用pH 7.4的缓冲液（0.1M磷酸盐缓冲液，0.15M NaCl）稀释至500mL备用。
References:
[1]Lai, Yongquan et al. “Using acridinium ester as the sonochemiluminescent probe for labeling of protein.” The Analyst vol. 134,1 (2009): 131-7. doi:10.1039/b813330a
| Cas No. | 177332-37-5 | SDF | |
| 别名 | 吖啶C2NHS酯 | ||
| Canonical SMILES | C[N+]1=C2C(C=CC=C2)=C(C(OC3=CC=C(CCC(ON4C(CCC4=O)=O)=O)C=C3)=O)C5=C1C=CC=C5.FC(F)(S(=O)([O-])=O)F | ||
| 分子式 | C28H23N2O6•CF3SO3 | 分子量 | 632.6 |
| 溶解度 | Soluble in DMSO | 储存条件 | Store at -20°C |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
 |
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.5808 mL | 7.9039 mL | 15.8078 mL |
| 5 mM | 0.3162 mL | 1.5808 mL | 3.1616 mL |
| 10 mM | 0.1581 mL | 0.7904 mL | 1.5808 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
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