ATP-Red 1
目录号 : GC30265
ATP-Red1是一种多位点结合可切换的荧光探针，能够选择性的快速检测活细胞中的ATP含量。
Cas No.:1847485-97-5
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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ATP-Red 1 is a multisite-binding switchable fluorescent probe, and can selectively and rapidly responds to intracellular concentrations of ATP in living cells.
ATP-Red 1 is a multisite-binding switchable fluorescent probe, and can selectively and rapidly responds to intracellular concentrations of ATP in living cells. The maximum absorption and emission wavelength of are 570/566 nm and 590/585 nm. ATP-Red 1 has good membrane permeability, and in the presence of 5 mM ATP, the fluorescence intensity of ATP-Red 1 increases 5.6-fold. ATP-Red 1 (2.5 μM, 20 min) shows much weaker fluorescence after KCN-induced inhibition of OXPHOS, which results in reduced mitochondrial ATP levels in OSCC cells[1].
[1]. Wang L, et al. A Multisite-Binding Switchable Fluorescent Probe for Monitoring Mitochondrial ATP Level Fluctuation in Live Cells. Angew Chem Int Ed Engl. 2016 Jan 26;55(5):1773-6
本方案仅提供一个指导，请根据您的具体需要进行修改。
1、制备染色液
（1）染料储存液:使用DMSO将ATP-Red 1溶解成5-10mM的储存液。配置好的储存液分装后于-20或-80℃避光保存。
（2）染料工作液:用合适的缓冲液(如:无血清培养基，HBSS或PBS)稀释储存液，配制浓度为1-10μM的ATP-Red 1工作液。
注意: 请根据实际情况调整及优化工作液浓度，现用现配。
2、细胞悬浮染色(以6 孔板为例)
（1）悬浮细胞经1000g离心3-5min。弃去上清液，使用PBS清洗两次，每次5分钟。
（2）贴壁细胞使用PBS清洗两次，加入胰酶消化细胞，消化完成后经1000g离心3-5min。
（3）加入1mL染料工作液重悬细胞，室温避光孵育15-30min分钟，不同细胞最佳培养时间不同。
（4）孵育结束后，经1000g离心5分钟，去除上清液，加入PBS清洗2-3次，每次5分钟。
（5）使用无血清细胞培养基或PBS重悬细胞，通过荧光显微镜或流式细胞技术进行观察。
3、细胞贴壁染色
（1）在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。
（2）从培养基中移走盖玻片，吸出过量的培养基，将盖玻片放在潮湿的环境中。
（3）从盖玻片的一角加入100μL染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞，室温避光孵育15-30min分钟。
（4）吸弃染料工作液，使用培养液清洗盖玻片2~3次，每次5分钟。
4、显微镜检测：ATP-Red 1的最大激发光/发射波长为510/590nm。
注意事项：
1）荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
References:
[1]. Wang L, et al. A Multisite-Binding Switchable Fluorescent Probe for Monitoring Mitochondrial ATP Level Fluctuation in Live Cells. Angew Chem Int Ed Engl. 2016 Jan 26;55(5):1773-6
| Cas No. | 1847485-97-5 | SDF | |
| Canonical SMILES | O=C1N(C2=CC=CC=C2B(O)O)C3(C4=C(OC5=C3C=CC(N(CC)CC)=C5)C=C(N(CC)CC)C=C4)C6=C1C=CC=C6 | ||
| 分子式 | C34H36BN3O4 | 分子量 | 561.48 |
| 溶解度 | DMSO : 50 mg/mL (89.05 mM);Water : < 0.1 mg/mL (insoluble) | 储存条件 | Store at -20°C,protect from light |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
||
| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
 |
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.781 mL | 8.905 mL | 17.8101 mL |
| 5 mM | 0.3562 mL | 1.781 mL | 3.562 mL |
| 10 mM | 0.1781 mL | 0.8905 mL | 1.781 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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