Biotin-11-dUTP
目录号 : GC50503Biotin-11-dUTP是dTTP的荧光替代品，在PCR、切口平移、cDNA合成、随机引物标记或引物延伸期间对DNA进行酶促非放射性标记。
Cas No.:86303-25-5
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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Biotin-11-dUTP is a fluorescent alternative to dTTP that enzymatically non-radioactively labels DNA during PCR, nick translation, cDNA synthesis, random primer labeling, or primer extension[1, 2]. Biotin-11-dUTP can be incorporated into DNA by reverse transcriptase, Taq DNA polymerase, phi29 DNA polymerase, exonuclease-inactive Klenow fragment, Klenow fragment, and DNA polymerase[3, 4, 5].
References:
[1] Green M R, Sambrook J. Preparation of labeled DNA, RNA, and oligonucleotide probes[J]. Cold Spring Harbor Protocols, 2022, 2022(1): pdb. top100578.
[2] Stutika C, Gogol-Döring A, Botschen L, et al. A comprehensive RNA sequencing analysis of the adeno-associated virus (AAV) type 2 transcriptome reveals novel AAV transcripts, splice variants, and derived proteins[J]. Journal of virology, 2016, 90(3): 1278-1289.
[3] Steck A L. Oligonucleotide-modified Nuclotides[J]. 2013.
[4] Bharati B K, Swetha R K, Chatterji D. Identification and characterization of starvation induced msdgc-1 promoter involved in the c-di-GMP turnover[J]. Gene, 2013, 528(2): 99-108.
[5] Anderson J P, Angerer B, Loeb L A. Incorporation of reporter-labeled nucleotides by DNA polymerases[J]. Biotechniques, 2005, 38(2): 257-264.
Biotin-11-dUTP是dTTP的荧光替代品，在PCR、切口平移、cDNA合成、随机引物标记或引物延伸期间对DNA进行酶促非放射性标记[1, 2]。Biotin-11-dUTP可以通过逆转录酶、Taq DNA聚合酶、phi29 DNA聚合酶、无外切酶活性的Klenow片段、Klenow片段和 DNA聚合酶整合进DNA[3, 4, 5]。
本方案仅提供一个指导，请根据您的具体需要进行修改。
1. 溶液配制
(1)工作液：本产品以溶液形式提供。
注意：最佳的工作浓度请根据实际情况调整或参阅文献自行设置梯度浓度进行摸索。工作液必须现配现用。
2. 用Biotin-11-dUTP进行DNA生物素化标记[1](来自文献,仅做参考)
(1) 用引物对靶基因片段进行PCR扩增。
(2) 将扩增子与20μM Biotin-11-dUTP、100μM脱氧核苷三磷酸（dNTP）和0.6单位Klenow片段在37°C下孵育5min。
(3) 未掺入的Biotin-11-dUTP和dNTP通过乙醇沉淀去除。
(4) 将生物素化的基因片段重新悬浮在25μL无菌水中，并与250μL链霉亲和素-琼脂糖珠在室温下混合1h，并不断旋转。
(5) 通过洗涤和洗脱级分的紫外特性测量DNA的生物素化。通过260、200、240和289nm处的特征紫外吸光度（对于生物素）和280nm处的特征紫外吸光度（对于链霉亲和素）来定量DNA的生物素化。
References:
[1] Bharati B K, Swetha R K, Chatterji D. Identification and characterization of starvation induced msdgc-1 promoter involved in the c-di-GMP turnover[J]. Gene, 2013, 528(2): 99-108.
References:
[1] Bharati B K, Swetha R K, Chatterji D. Identification and characterization of starvation induced msdgc-1 promoter involved in the c-di-GMP turnover[J]. Gene, 2013, 528(2): 99-108.
| Cas No. | 86303-25-5 | SDF | |
| Canonical SMILES | [H][C@]12CS[C@H]([C@]1(NC(N2)=O)[H])CCCCC(NCCCCCC(NC/C=C/C3=CN(C(NC3=O)=O)[C@H]4C[C@@H]([C@H](O4)COP([O-])(OP([O-])(OP([O-])([O-])=O)=O)=O)O)=O)=O.CC[N+]([H])(CC)CC.CC[N+]([H])(CC)CC.CC[N+]([H])(CC)CC.CC[N+]([H])(CC)CC | ||
| 分子式 | C28H45N6O17P3S | 分子量 | 862.68 |
| 溶解度 | 10mM Tris-HCl buffer (supplied pre-dissolved - 1mM) to 1 mM | 储存条件 | Store at -20°C |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
||
| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
 |
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.1592 mL | 5.7959 mL | 11.5918 mL |
| 5 mM | 0.2318 mL | 1.1592 mL | 2.3184 mL |
| 10 mM | 0.1159 mL | 0.5796 mL | 1.1592 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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- Purity: >98.50%
- COA (Certificate Of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet