BODIPY-aminoacetaldehyde diethyl acetal
(Synonyms: BAAA-DA) 目录号 : GC46939BODIPY-aminoacetaldehyde diethyl acetal（BAAA-DA）是BODIPY-氨基乙醛（BAAA）的稳定前体，BAAA是醛脱氢酶（ALDH）的细胞渗透性荧光底物，Ex/Em为488/512nm。
Cas No.:247069-93-8
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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BODIPY-aminoacetaldehyde diethyl acetal (BAAA-DA) is a stable precursor of BODIPY-aminoacetaldehyde (BAAA), a cell-permeable fluorescent substrate for aldehyde dehydrogenase (ALDH) with an Ex/Em of 488/512nm[1-4].
BODIPY-aminoacetaldehyde diethyl acetal converts to BAAA in acidic conditions. BAAA is uncharged and can diffuse freely across the plasma membrane of intact living cells with cellular permeability. BAAA is converted into Bodipy-amino acetic acid (BAA) intracellular by ALDH, which is retained by cells due to the net negative charge of BAA and can be used to identify cells with high ALDH activity [1-2]. BODIPY-aminoacetaldehyde diethyl acetal has been used to isolate human hematopoietic progenitor cells, which have high ALDH activity, and via flow cytometry to sort cancer stem cells that contain high levels of ALDH[1，3]. BODIPY-aminoacetaldehyde diethyl acetal can be used to characterize live ALDHpos cells, and the BAA used in the cells can be excited at 488nm with a maximum emission wavelength of 512nm[4].
References:
[1] Storms R W, Trujillo A P, Springer J B, et al. Isolation of primitive human hematopoietic progenitors on the basis of aldehyde dehydrogenase activity[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 1999, 96(16): 9118-9123.
[2] Moreb J S, Zucali J R, Ostmark B, et al. Heterogeneity of aldehyde dehydrogenase expression in lung cancer cell lines is revealed by Aldefluor flow cytometry‐based assay[J]. Cytometry Part B: Clinical Cytometry: The Journal of the International Society for Analytical Cytology, 2007, 72(4): 281-289.
[3] Leng Z, Yang Z, Li L, et al. A reliable method for the sorting and identification of ALDHhigh cancer stem cells by flow cytometry[J]. Experimental and Therapeutic Medicine, 2017, 14(4): 2801-2808.
[4] Pomper M G, Wang H, Minn I, et al. Red fluorescent aldehyde dehydrogenase (ALDH) substrate: U.S. Patent 10,156,521[P]. 2018-12-18.
BODIPY-aminoacetaldehyde diethyl acetal（BAAA-DA）是BODIPY-氨基乙醛（BAAA）的稳定前体，BAAA是醛脱氢酶（ALDH）的细胞渗透性荧光底物，Ex/Em为488/512nm[1-4]。
BODIPY-aminoacetaldehyde diethyl acetal在酸性条件下转化为BAAA。BAAA不带电荷，可以在完整活细胞的质膜上自由扩散，具有细胞渗透性。BAAA通过ALDH在细胞内转化为BODIPY-氨基乙酸（BAA），由于BAA净负电荷，BAA被细胞保留并可用于识别具有高ALDH活性的细胞[1-2]。BODIPY-aminoacetaldehyde diethyl acetal已用于分离具有高ALDH活性的人造血祖细胞，并通过流式细胞术分选含有高水平ALDH的癌症干细胞[1，3]。BODIPY-aminoacetaldehyde diethyl acetal可用于鉴定活ALDHpos细胞，可以在488nm处激发，最大发射波长为512nm[4]。
本实验方案来自文献，请根据具体需要进行修改。
1、制备BODIPY-aminoacetaldehyde diethyl acetal染色液
(1)配制BODIPY-aminoacetaldehyde diethyl acetal染料储存液：使用DMSO溶解固体粉末，配置成BODIPY-aminoacetaldehyde diethyl acetal染料储存液。
注意：BODIPY-aminoacetaldehyde diethyl acetal储存液建议分装后于-4℃或-20℃避光保存，避免反复冻融。
(2)工作液制备：加入等体积的2N HCl将BODIPY-aminoacetaldehyde diethyl acetal转化为BAAA，2小时后，加入合适的缓冲液（如PBS），配制浓度为1-20μM的BODIPY-aminoacetaldehyde diethyl acetal工作液。
注意：请根据实际情况调整BODIPY-aminoacetaldehyde diethyl acetal工作液浓度，现用现配。
2、细胞染色
悬浮细胞：悬浮细胞经1000g离心3-5分钟。弃去上清液，使用PBS清洗两次，每次5分钟。
贴壁细胞：加入胰蛋白酶消化细胞，1000g离心3-5分钟。弃去上清液，使用PBS清洗两次，每次5分钟。
(1)在收取的细胞中加入1mL的BODIPY-aminoacetaldehyde diethyl acetal工作液，37℃避光孵育30-60分钟。
(2)孵育结束后，经1000g离心5分钟，去除上清液，加入PBS清洗2-3次，每次5分钟。
(3)使用PBS重悬细胞，通过流式细胞仪进行分析（Ex/Em为488/512nm）。
注意事项：
①本品为未活化的荧光染料，需先使用酸（2N HCl）进行活化；
②荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光；
③为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
参考文献:
[1] Moreb J S, Ucar D, Han S, et al. The enzymatic activity of human aldehyde dehydrogenases 1A2 and 2 (ALDH1A2 and ALDH2) is detected by Aldefluor, inhibited by diethylaminobenzaldehyde and has significant effects on cell proliferation and drug resistance[J]. Chemico-biological interactions, 2012, 195(1): 52-60.
[2] Storms R W, Trujillo A P, Springer J B, et al. Isolation of primitive human hematopoietic progenitors on the basis of aldehyde dehydrogenase activity[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 1999, 96(16): 9118-9123.
| Cas No. | 247069-93-8 | SDF | |
| 别名 | BAAA-DA | ||
| Canonical SMILES | [F-][B+3]1([N-]2C(C=C(C(C)=C3)[N]1=C3C)=CC=C2CCC(NCC(OCC)OCC)=O)[F-] | ||
| 分子式 | C20H28BF2N3O3 | 分子量 | 407.3 |
| 溶解度 | 储存条件 | Store at -20°C,protect from light | |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
 |
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.4552 mL | 12.276 mL | 24.5519 mL |
| 5 mM | 0.491 mL | 2.4552 mL | 4.9104 mL |
| 10 mM | 0.2455 mL | 1.2276 mL | 2.4552 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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