BODIPY FL C5-Ceramide
目录号 : GC68793BODIPY Fl C5-Ceramide 是一种高尔基体特异性绿色荧光染料,可实现单个细胞可视化。Ex/Em=505 nm/512 nm。
Cas No.:133867-53-5
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
Quality Control & SDS
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- Purity: >99.00%
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使用方法
1.Golgi 工作液配制
1.1 制备储存液
用 DMSO 配制 5 mM 储备液。
注意:建议将储备液在 -20°C 或 -80°C 避光保存,避免反复冻融循环。
1.2 工作液的配制
用预热好的 PBS 或培养基溶液,配制成 1-10 μM 的 Golgi 工作液。
注:请根据实际情况调整 Golgi 1-43 工作液浓度,且现用现配。
2. 细胞染色(悬浮细胞)
2.1 收集细胞:1,000 g,4°C,离心 3-5 分钟,弃去上清。加入 PBS 洗涤两次,每次 5 分钟。细胞密度在 1×106/mL。
2.2 加入 1 mL Golgi 工作液,室温孵育 20-30 分钟。
2.3 400 g,4°C,离心 3-4 分钟,弃去上清。
2.4 加入 PBS 洗涤细胞两次,每次 5 分钟。
2.5 用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后,使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。
3. 细胞染色(贴壁细胞)
3.1 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
3.2 从培养基中移出盖玻片,吸除多余培养基。
3.3 加入 100 μL 染料工作液,轻轻晃动使其完全覆盖细胞,孵育20-30 分钟。
3.4 吸去染料工作液,用培养基洗 2 次,每次 5 分钟,使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。
保存条件
-20℃ 避光保存一年
注意事项
1. 建议储存液在 -20℃ 或 -80℃ 避光保存,避免反复冻融。
2. 请根据实际情况调整 Golgi 1-43 工作液浓度与孵育时间。
3. 或使用效果不佳,去除细胞培养液时,可用适量 Hanks 平衡盐溶液对细胞进行洗涤。
4. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
BODIPY Fl C5-Ceramide is a Golgi-specific green fluorescent dye, which can visualise individual cells[2]. Ex/Em= 505 nm/512 nm.The Golgi apparatus is composed of flattened vesicles superimposed on each other by unit membranes. The flattened vesicles are round with expanded and perforated edges. The Golgi fluorescent probe is a BODIPY-labeled ceramide derivative, the synthesis of which occurs in the endoplasmic reticulum and can then be transported to the Golgi via ceramide transport protein (CERT) or vesicular translocation, allowing specific labeling of the dye[1].
References:
[1]. Alamudi SH, et al. Development of background-free tame fluorescent probes for intracellular live cell imaging. Nat Commun. 2016 Jun 20;7:11964.
[2]. Podgorny OV, et al. Isolation of single Chlamydia-infected cells using laser microdissection. J Microbiol Methods. 2015 Feb;109:123-8.
BODIPY Fl C5-Ceramide 是一种高尔基体特异性绿色荧光染料,可实现单个细胞可视化。Ex/Em=505 nm/512 nm。高尔基体是由单位膜构成的扁平囊叠加在一起所组成。扁平囊为圆形,边缘膨大且具有穿孔。 高尔基体荧光探针是一种 BODIPY 标记的神经酰胺衍生物。神经酰胺的合成发生在内质网,高尔基体荧光探针可以通过神经酰胺转运蛋白(CERT)或囊泡转运输送到高尔基体,从而实现染料的特异性标记。
Cas No. | 133867-53-5 | SDF | Download SDF |
分子式 | C34H54BF2N3O3 | 分子量 | 601.62 |
溶解度 | DMSO : 50 mg/mL (83.11 mM; ultrasonic and warming and heat to 60°C) | 储存条件 | Store at -20°C, protect from light |
General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限:-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度,请将管子加热至37℃,然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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Shipping Condition | 评估样品解决方案:配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸:配备RT,或根据请求配备蓝冰。 |
制备储备液 | |||
1 mg | 5 mg | 10 mg | |
1 mM | 1.6622 mL | 8.3109 mL | 16.6218 mL |
5 mM | 0.3324 mL | 1.6622 mL | 3.3244 mL |
10 mM | 0.1662 mL | 0.8311 mL | 1.6622 mL |
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量) | ||||||||||
给药剂量 | mg/kg | 动物平均体重 | g | 每只动物给药体积 | ul | 动物数量 | 只 | |||
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方) | ||||||||||
% DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
计算重置 |
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL saline,混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的;
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。