Bromobimane (Monobromobimane)
(Synonyms: 荧光专用试剂; Monobromobimane; (mBBr); 单溴二胺 ) 目录号 : GC30043
Bromobimane (Monobromobimane)是一种细胞可渗透的硫醇反应性荧光探针，最大吸收和发射波长分别为398nm和490nm。
Cas No.:71418-44-5
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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Bromobimane (Monobromobimane) is a cell-permeable, thiol-reactive fluorescent probe with maximum absorption and emission wavelengths at 398nm and 490nm, respectively[1, 2, 3]. Bromobimane (Monobromobimane) reacts rapidly with available sulfhydryl groups at physiological pH and produces a stable fluorescent signal[4]. Bromobimane (Monobromobimane) can be used to evaluate or quantify a variety of compounds containing reactive sulfur or thiol groups, including H2S, glutathione (GSH), proteins, and nucleotides[5, 6]. Bromobimane (Monobromobimane) can be used to label GSH in liver sections on slides[7].
References:
[1] Maeda K, Hägglund P, Finnie C, et al. Proteomics of disulphide and cysteine oxidoreduction[J]. Annual Plant Reviews Volume 28: Plant Proteomics, 2006: 71-97.
[2] Weber J, Bijol V, Wilke-Mounts S, et al. Cysteine-reactive fluorescence probes of catalytic sites of ATP synthase[J]. Archives of biochemistry and biophysics, 2002, 397(1): 1-10.
[3] Mohsin N Y, Demir H, Hadwan M H, et al. A New Fluorescent Method for Measuring Peroxiredoxin Enzyme Activity Using Monobromobimane[J]. Journal of Fluorescence, 2024: 1-9.
[4] Sardi F, Manta B, Portillo-Ledesma S, et al. Determination of acidity and nucleophilicity in thiols by reaction with monobromobimane and fluorescence detection[J]. Analytical Biochemistry, 2013, 435(1): 74-82.
[5] Głowacki R, Piechocka J, Bald E, et al. Application of separation techniques in analytics of biologically relevant sulfur compounds[M]//Handbook of Bioanalytics. Cham: Springer International Publishing, 2022: 1-24.
[6] Gilbert H T J, Mallikarjun V, Dobre O, et al. Nuclear decoupling is part of a rapid protein-level cellular response to high-intensity mechanical loading[J]. Nature communications, 2019, 10(1): 4149.
[7] Wang H, Zhang R, Bridle K R, et al. Two-photon dual imaging platform for in vivo monitoring cellular oxidative stress in liver injury[J]. Scientific Reports, 2017, 7(1): 45374.
Bromobimane (Monobromobimane)是一种细胞可渗透的硫醇反应性荧光探针，最大吸收和发射波长分别为398nm和490nm[1, 2, 3]。Bromobimane (Monobromobimane)能够在生理pH下与可用的巯基快速反应，并产生稳定的荧光信号[4]。Bromobimane (Monobromobimane)可用于评估或定量各种含有活性硫或硫醇基团的化合物，包括H2S、谷胱甘肽（GSH）、蛋白质和核苷酸[5, 6]。Bromobimane (Monobromobimane)能够用于在载玻片上标记肝脏切片中的GSH[7]。
本方案仅提供一个指导，请根据您的具体需要进行修改。
1. 溶液配制
(1)储存液：用DMSO或乙腈溶解Bromobimane，配置浓度为100mM的储存液。
注意：储存液应用惰性气体吹扫。未使用的储存液分装后在-20℃或-80°C避光保存，避免反复冻融。
(2)工作液：正式实验前，用合适的缓冲液(如:无血清培养基或PBS)稀释储存液，到所需的工作浓度，如:400μM。
注意：最佳的工作浓度请根据实际情况调整或参阅文献自行设置梯度浓度进行摸索。工作液必须现配现用。
2. 用Bromobimane标记蛋白质[1](来自文献,仅做参考)
(1) 除去细胞培养基，并在PBS中洗涤细胞。
(2) 在37°C下与PBS中的2mL 400μM Bromobimane孵育10min来标记细胞。
(3) 向每个孔中加入50μL 0.4M谷胱甘肽的PBS溶液，以淬灭Bromobimane反应。
(4) 除去Bromobimane溶液，并用PBS洗涤细胞。在37°C下与1mL胰蛋白酶孵育10min，使细胞与底物分离。
(5) 用含血清培养基中和胰蛋白酶活性，用400g离心5min沉淀细胞。
(6)将细胞重悬于冷PBS中，用400g离心5min沉淀细胞。在蛋白质组学分析前将细胞沉淀物储存在-20℃。
References:
[1] Gilbert H T J, Mallikarjun V, Dobre O, et al. Nuclear decoupling is part of a rapid protein-level cellular response to high-intensity mechanical loading[J]. Nature communications, 2019, 10(1): 4149.
References:
[1] Gilbert H T J, Mallikarjun V, Dobre O, et al. Nuclear decoupling is part of a rapid protein-level cellular response to high-intensity mechanical loading[J]. Nature communications, 2019, 10(1): 4149.
| Cas No. | 71418-44-5 | SDF | |
| 别名 | 荧光专用试剂; Monobromobimane; (mBBr); 单溴二胺 | ||
| Canonical SMILES | O=C1N(C(C(C)=C2C)=O)N2C(CBr)=C1C | ||
| 分子式 | C10H11BrN2O2 | 分子量 | 271.11 |
| 溶解度 | DMSO : ≥ 86.6 mg/mL (319.43 mM) | 储存条件 | Store at -20°C, protect from light |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
||
| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
 |
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 3.6885 mL | 18.4427 mL | 36.8854 mL |
| 5 mM | 0.7377 mL | 3.6885 mL | 7.3771 mL |
| 10 mM | 0.3689 mL | 1.8443 mL | 3.6885 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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