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Dihydrorhodamine 123 (DHR 123) Sale

(Synonyms: 二氢罗丹明123; DHR 123) 目录号 : GC30581

Dihydrorhodamine 123 (DHR 123)是一种非荧光前体,它在氧化时转化为荧光化合物rhodamine 123(Rh123+ )。

Dihydrorhodamine 123 (DHR 123) Chemical Structure

Cas No.:109244-58-8

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Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.

Description

Dihydrorhodamine 123 (DHR 123) is a non-fluorescent precursor that transforms into the fluorescent compound rhodamine 123 (Rh123+) upon oxidation. This transformation process makes DHR 123 a useful tool for detecting reactive oxygen species (ROS) within cells. Dihydrorhodamine 123 can cross the cell membrane, and once inside the cell, it is oxidized by ROS into Rh123+, producing green fluorescence that accumulates in the mitochondrial matrix. The excitation wavelength of Rh123+ is 485nm, and its emission wavelength is 528nm[1]. Dihydrorhodamine 123 can also be used as an indicator for the formation of intracellular peroxynitrite[2].

References:

[1] Wing-Kee Lee, Stephanie Probst, Bettina Scharner, et al. Distinct concentration-dependent oxidative stress profiles by cadmium in a rat kidney proximal tubule cell line[J] Archives of Toxicology. 30 January 2024.

[2] Crow, J.P. Dichlorodihydrofluorescein and dihydrorhodamine 123 are sensitive indicators of peroxynitrite in vitro: Implications for intracellular measurement of reactive nitrogen and oxygen species Nitric Oxide1(2)145-157(1997).

Dihydrorhodamine 123 (DHR 123)是一种非荧光前体,它在氧化时转化为荧光化合物rhodamine 123(Rh123+ )。这种转换过程使得DHR 123成为检测细胞内活性氧种类(ROS)的有用工具。Dihydrorhodamine 123可以穿过细胞膜,进入细胞内部会被活性氧氧化成Rh123+,产生绿色荧光,在线粒体基质中积累。Rh123+激发波长为485nm,发射波长为528nm[1]Dihydrorhodamine 123也可以用作细胞内过氧亚硝酸盐形成的指示剂[2]

实验参考方法

本方案仅提供一个指导,请根据您的具体需要进行修改。

1. 制备染色液

(1)配置储存液:使用DMSO溶解Dihydrorhodamine 123 (DHR 123),配置浓度为1-10mM的储存液。

注意:未使用的储存液分装后在-20℃或-80°C避光保存,避免反复冻融。

(2)配置工作液:用合适的缓冲液(如:无血清培养基或PBS)稀释储存液,配制浓度为1-10μM的工作液。

注意:请根据实际情况调整工作液浓度,现用现配。

2.细胞悬浮染色

(1)悬浮细胞:经4°C、1000g离心3-5分钟,弃去上清液,使用PBS清洗两次,每次5分钟。

(2)贴壁细胞:使用PBS清洗两次,加入胰酶消化细胞,消化完成后经1000g离心3-5min。

(3)加入DHR 123工作溶液重悬细胞,室温避光孵育5-30分钟。不同细胞最佳孵育时间不同,请根据具体实验需求自行摸索。

(4)孵育结束后,经1000g离心5分钟,去除上清液,加入PBS清洗2-3次,每次5分钟。

(5)用预温的无血清细胞培养基或PBS重悬细胞,通过荧光显微镜或流式细胞术观察。

3.细胞贴壁染色

(1)在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。

(2)从培养基中移走盖玻片,吸出过量的培养基,将盖玻片放在潮湿的环境中。

(3)从盖玻片的一角加入100μL的染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。

(4) 室温避光孵育5-30分钟。不同细胞最佳孵育时间不同,请根据具体实验需求自行摸索。

(5)孵育结束后吸弃染料工作液,使用预温的培养液清洗盖玻片2~3次。

4.显微镜检测:DHR 123的最大激发/发射波长为485/528nm。

 

注意事项:

1)荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

化学性质

Cas No. 109244-58-8 SDF
别名 二氢罗丹明123; DHR 123
Canonical SMILES O=C(OC)C1=CC=CC=C1C2C3=C(OC4=C2C=CC(N)=C4)C=C(N)C=C3
分子式 C21H18N2O3 分子量 346.38
溶解度 DMSO: 100 mg/mL (288.70 mM) 储存条件 Store at -20°C,protect from light
General tips 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
储备液的保存方式和期限:-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。
为了提高溶解度,请将管子加热至37℃,然后在超声波浴中震荡一段时间。
Shipping Condition 评估样品解决方案:配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸:配备RT,或根据请求配备蓝冰。

溶解性数据

制备储备液
1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.887 mL 14.435 mL 28.87 mL
5 mM 0.5774 mL 2.887 mL 5.774 mL
10 mM 0.2887 mL 1.4435 mL 2.887 mL
  • 摩尔浓度计算器

  • 稀释计算器

  • 分子量计算器

质量
=
浓度
x
体积
x
分子量
 
 
 
*在配置溶液时,请务必参考产品标签上、MSDS / COA(可在Glpbio的产品页面获得)批次特异的分子量使用本工具。

计算

动物体内配方计算器 (澄清溶液)

第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
给药剂量 mg/kg 动物平均体重 g 每只动物给药体积 ul 动物数量
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方)
% DMSO % % Tween 80 % saline
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