DiI (DiIC18(3))
(Synonyms: 1,1`-双十八烷基-3,3,3`,3`-四甲基吲哚羰花青高氯酸盐,DiIC18(3)) 目录号 : GC33425
DiI (DiIC18(3))是一种长链羰花青染料，被广泛用作Di来标记细胞，细胞器，脂质体，病毒和脂蛋白。
Cas No.:41085-99-8
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
DiI (DiIC18(3)) is a long-chain carbocyanine dye widely used as Di to label cells, organelles, liposomes, viruses and lipoproteins. DiI exhibits distinct orange fluorescence, facilitating multicolor imaging and flow cytometry analysis of live cells. DiI (DiIC18(3)) can be used as a fluorescent tracer of neurons for labeling cell bodies, axons, dendrites and dendritic spines, DiI (DiIC18(3)) was used as an anterograde tracer to study Neuronal development in vivo and used as a retrograde tracer to label hippocampal neuronal connections in fixed postmortem brain tissue[1]. Dil has also been used as a long-term plasma membrane marker in living cells[2].
DiI (DiIC18(3))是一种长链羰花青染料，被广泛用作Di来标记细胞，细胞器，脂质体，病毒和脂蛋白。DiI表现出明显的橙色荧光，从而促进活细胞的多色成像和流式细胞术分析。DiI (DiIC18(3))能够作为神经元的荧光示踪剂，用于标记细胞体、轴突、树突和树突棘，DiI (DiIC18(3))被用作顺行示踪剂来研究体内神经元发育，并用作逆行示踪剂来标记固定死后脑组织中的海马神经元连接[1]。Dil 也被用作活细胞中的长期质膜标记[2]。
References:
[1]. Mufson, E.J., Brady, D.R., and Kordower, J.H.Tracing neuronal connections in postmortem human hippocampal complex with the carbocyanine dye DiINeurobiol. Aging11(6)649-653(1990).
[2]. Honig, M.G., and Hume, R.I.Dil and diO: Versatile fluorescent dyes for neuronal labelling and pathway tracingTrends Neurosci.12(9)333-335(1989).
本方案仅提供一个指导，请根据您的具体需要进行修改。
1.细胞膜染色液制备
（1）配置DMSO或EtOH 储存液:储存液用DMSO或EtOH配置,浓度1~5mM。
注意:未使用的储存液分装保存在-20℃避光保存，避免反复冻融。
（2）工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基，HBSS或PBS)稀释储存液，配制浓度为0.5~5μM的工作液。
注意:工作液的最终浓度是根据不同细胞和实验的经验来配制。可以从推荐浓度的十倍以上寻找最佳条件。
2.悬浮细胞染色
（1）悬浮细胞经4°C、1000g离心3-5分钟，弃去上清液。用PBS清洗两次，每次5分钟。
（2）加入1mL的染料工作溶液，室温避光孵育5-30分钟。
注意：不同的细胞最佳培养时间不同，可以根据具体实验需求进行调整。
（3）孵育结束后，经1000-1500g离心5分钟，去除上清液，加入PBS清洗2-3次，每次5分钟。
（4）用预温的无血清细胞培养基或PBS重悬细胞。通过荧光显微镜或流式细胞术观察。
3.贴壁细胞染色
（1）在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。
（2）从培养基中移走盖玻片，吸出过量的培养基，将盖玻片放在潮湿的环境中。
（3）从盖玻片的一角加入100uL的染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
（4）室温避光孵育5-30分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。
（5）孵育结束后吸弃染料工作液，用预温的培养液洗盖玻片2~3次。
4.外泌体染色
（1）取适当体积的Di染料储备液，添加到收集到的外泌体过滤上清液中，以达到5 μM的最终浓度，使用移液枪轻轻混匀；
（2）室温避光孵育30分钟，每5分钟轻轻翻转一次。
（3）将孵育完成的样品转移至离心管中，使用超速离心机中以100000g、 4°C的条件离心3小时；
（4）离心完成后在超净台中小心倾斜并弃去上清液，使用带无菌吸头的微量移液器，移去在试管内形成但未滴落的液体，即为标记好的外泌体；
注意：在该步骤中，游离染料随倾析的上清液一起消失，因此可以倾析溶液，但始终注意不要丢失沉淀。
5.显微镜检测：DiI(DiIC18(3))的激发/发射光分别为549/565 nm。
注意事项：
1）荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
| Cas No. | 41085-99-8 | SDF | |
| 别名 | 1,1`-双十八烷基-3,3,3`,3`-四甲基吲哚羰花青高氯酸盐,DiIC18(3) | ||
| Canonical SMILES | CCCCCCCCCCCCCCCCCC[N+]1=C(/C=C/C=C2N(CCCCCCCCCCCCCCCCCC)C3=C(C=CC=C3)C/2(C)C)C(C)(C)C4=C1C=CC=C4.O=Cl(=O)([O-])=O | ||
| 分子式 | C59H97ClN2O4 | 分子量 | 933.87 |
| 溶解度 | DMSO : 16.67 mg/mL (17.85 mM) | 储存条件 | Store at -20°C, protect from light |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.0708 mL | 5.3541 mL | 10.7081 mL |
| 5 mM | 0.2142 mL | 1.0708 mL | 2.1416 mL |
| 10 mM | 0.1071 mL | 0.5354 mL | 1.0708 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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