Dispase II

Dispase即为中性蛋白酶，也称分散酶，是一种非特异性的金属蛋白酶，用于从不同组织或器官中消化细胞外基质，释放并制备原代单细胞；或用于细胞培养中的细胞收获或接种转移；也被用于防止悬浮细胞培养时的细胞意外结团 常用的胰蛋白酶、Dispase即为中性蛋白酶，也称分散酶，是一种非特异性的金属蛋白酶，用于从不同组织或器官中消化细胞外基质，释放并制备原代单细胞；或用于细胞培养中的细胞收获或接种转移；也被用于防止悬浮细胞培养时的细胞意外结团 常用的胰蛋白酶、胶原酶和链酶蛋白酶都属于蛋白水解酶类，用于分散组织、分离细胞，但其对细胞伤害大，细胞在培养时不稳定，甚至引入支原体污染。Dispase不会伤害细胞膜，且因为其来源于细菌，故不会引入支原体或任何动物病毒；温度、pH、血清成分等的差异对Dispase影响很小。Dispase经稀释后其活性就大大降低，这也方便了后续的培养。 胶原酶和链酶蛋白酶都属于蛋白水解酶类，用于分散组织、分离细胞，但其对细胞伤害大，细胞在培养时不稳定，甚至引入支原体污染。Dispase不会伤害细胞膜，且因为其来源于细菌，故不会引入支原体或任何动物病毒；温度、pH、血清成分等的差异对Dispase影响很小。Dispase经稀释后其活性就大大降低，这也方便了后续的培养。
Dispase优点：该酶作用迅速有效又温和； 细胞能保持完整，无损细胞膜； 该酶为细菌来源，不含支原体或动物病毒污染； 对于温度、pH的改变、以及血清成分都很稳定； 使用螯合剂或稀释即可简单灭活。

酶活定义： 1U是在检测条件下1分钟释放相当于1 umol酪氨酸的Folin阳性氨基酸或肽的酶量；DispaseII：50U/mg (37度，使用酪蛋白作为底物，pH 7.5)；

抑制剂： EDTA、EGTA、Hg2+、其他重金属。血清不会抑制酶活性。

使用方法： 用Hepes-buffered saline (50 mM Hepes/KOH pH 7.4, 150 mM NaCl)溶解Dispase至10 mg/ml，使用时用细胞培养液稀释到0.6-2.4 U/ml。不推荐高于2.4 U/ml的工作浓度，可用0.22 um的无菌滤膜过滤除菌。