DMPO
(Synonyms: 5,5-二甲基-1-吡咯啉-N-氧化物) 目录号 : GC13957
DMPO（5,5-二甲基-1-吡咯啉-N-氧化物）是一种水溶性一氧化氮自旋捕获剂，可利用电子自旋共振（ESR）在室温下测量生物系统中以氧为中心的自由基。
Cas No.:3317-61-1
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
DMPO (5,5-dimethyl-1-pyrroline-N-oxide) is a water-soluble nitric oxide spin trap that can be used to measure oxygen-centered free radicals in biological systems at room temperature using electron spin resonance (ESR) [1]. The spin trap reacts with free radicals to form stable adducts that can be further studied [2]. DMPO is water-soluble, rapidly permeates lipid bilayers, has low toxicity, and can be used in vitro and in vivo [3, 4].
In vitro, DMPO (50 mM) treatment of RAW 264.7 macrophages for 24 h showed anti-inflammatory activity, reduced inducible nitric oxide synthase (iNOS) expression, inhibited the phosphorylation of MAPK, Akt and IκBα, and reduced NF-κB p65 translocation[5].
In vivo, DMPO (10-100 mg/kg, intraperitoneal injection) had an analgesic effect on formalin-induced hyperalgesia in rats[6].
References:
[1] Wang P, Zweier J L. Measurement of nitric oxide and peroxynitrite generation in the postischemic heart: evidence for peroxynitrite-mediated reperfusion injury[J]. Journal of Biological Chemistry, 1996, 271(46): 29223-29230.
[2] Bačić G, Spasojević I, Šećerov B, et al. Spin-trapping of oxygen free radicals in chemical and biological systems: new traps, radicals and possibilities[J]. Spectrochimica Acta Part A: Molecular and Biomolecular Spectroscopy, 2008, 69(5): 1354-1366.
[3]West M B, Rokosh G, Obal D, et al. Cardiac myocyte–specific expression of inducible nitric oxide synthase protects against ischemia/reperfusion injury by preventing mitochondrial permeability transition[J]. Circulation, 2008, 118(19): 1970-1978.
[4]Qin X, Wu C, Niu D, et al. Peroxisome inspired hybrid enzyme nanogels for chemodynamic and photodynamic therapy[J]. Nature Communications, 2021, 12(1): 5243.
[5]Zhai Z, Gomez-Mejiba S E, Zhu H, et al. The spin trap 5, 5-dimethyl-1-pyrroline N-oxide inhibits lipopolysaccharide-induced inflammatory response in RAW 264.7 cells[J]. Life sciences, 2012, 90(11-12): 432-439.
[6]Chung W S, Go Y G, Lee W H. Antinociceptive effect of intraperitoneally administered 5, 5-dimethyl-1-pyrroline N-oxide on formalin induced nociception in rats[J]. Korean J Anesthesiol, 2008, 54(3).
DMPO（5,5-二甲基-1-吡咯啉-N-氧化物）是一种水溶性一氧化氮自旋捕获剂，可利用电子自旋共振（ESR）在室温下测量生物系统中以氧为中心的自由基[1]。自旋捕获剂与自由基反应，形成可进一步研究的稳定加合物[2]。DMPO是水溶性的，快速渗透脂质双层，毒性低，可在体外和体内使用[3, 4]。
在体外，DMPO（50 mM）处理RAW 264.7巨噬细胞24h，显示出抗炎活性，降低了诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达，抑制了MAPK、Akt和IκBα的磷酸化，并减少NF-κB p65易位[5]。
在体内，DMPO（10-100 mg/kg，腹腔注射）对福尔马林诱导的痛觉过敏大鼠具有镇痛作用[6]。
本方案仅提供一个指导，请根据您的具体需要进行修改。
1. 溶液配制
（1）工作液：用实验缓冲液溶解DMPO，终浓度为1 M。使用0.22μm滤膜过滤除菌。
注意：最佳的工作浓度请根据实际情况调整或参阅文献自行设置梯度浓度进行摸索。工作液必须现配现用。
2.体内使用DMPO检测氧自由基[1, 2](来自文献,仅做参考)
（1）使用戊巴比妥钠（5 mg）进行腹腔内麻醉诱导。切除心脏，将升主动脉套管接入，以恒定流速（2 mL/min）使用Krebs-Henseleit缓冲液灌流。
（2）缺血后，将DMPO溶解在含有100 μM二乙烯三胺五乙酸（DTPA）的缓冲液中，终浓度为1 M。再灌注时立即通过靠近心脏的侧臂以100 μL/min的速率注入陷阱。
（3）再灌注期间，定期收集流出物，直至按指定的时间间隔再灌注 5 分钟。收集样品后，立即将每个管冷冻在液氮中。
（4）使用光谱仪检测和记录DMPO捕获的氧自由基的信号。
3.体外使用DMPO检测羟基自由基[3](来自文献,仅做参考)
（1）将不同浓度的Fe3O4溶液加入到1 mL的试样中。
向每个试样中加入10 μL的DMPO工作液作为自由基捕获剂。将试样在37°C条件下孵育6小时，确保反应充分进行。向1 mL PBS中加入10 μL的DMPO工作液作为反应液的对照组。
（2）使用0.22 µm的滤膜将反应液过滤，以去除固体残渣和大颗粒物质。
（3）使用光谱仪检测和记录DMPO捕获的羟基自由基的信号。
注意：该方案为体内和体外使用DMPO检测以氧为中心的自由基提供指导。可以根据其他文献和具体实验要求进行调整。
References:
[1]West M B, Rokosh G, Obal D, et al. Cardiac myocyte–specific expression of inducible nitric oxide synthase protects against ischemia/reperfusion injury by preventing mitochondrial permeability transition[J]. Circulation, 2008, 118(19): 1970-1978.
[2]Wang P, Chen H, Qin H, et al. Overexpression of human copper, zinc-superoxide dismutase (SOD1) prevents postischemic injury[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 1998, 95(8): 4556-4560.
[3]Qin X, Wu C, Niu D, et al. Peroxisome inspired hybrid enzyme nanogels for chemodynamic and photodynamic therapy[J]. Nature Communications, 2021, 12(1): 5243.
| Cas No. | 3317-61-1 | SDF | |
| 别名 | 5,5-二甲基-1-吡咯啉-N-氧化物 | ||
| 化学名 | 2,2-dimethyl-3,4-dihydro-2H-pyrrole 1-oxide | ||
| Canonical SMILES | [O-][N+]1=CCCC1(C)C | ||
| 分子式 | C6H11NO | 分子量 | 113.16 |
| 溶解度 | H2O : ≥ 100 mg/mL (883.70 mM) DMSO : 100 mg/mL (883.70 mM; Need ultrasonic) | 储存条件 | Store at -20°C |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 8.837 mL | 44.1852 mL | 88.3704 mL |
| 5 mM | 1.7674 mL | 8.837 mL | 17.6741 mL |
| 10 mM | 0.8837 mL | 4.4185 mL | 8.837 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
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