DOPE
目录号 : GC50735DOPE(Dioleoylphosphatidylethanolamine)是阳离子脂质体的中性辅助脂质,与阳离子磷脂结合使用,能够提高裸siRNA的转染效率。DOPE与DA、DOTAP或DC-胆固醇组合使用,能够增强脂质体和lipoplex转染效率,使用的确切比例和转染效率取决于所用的细胞系。
Cas No.:4004-05-1
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
DOPE (Dioleoylphosphatidylethanolamine) is a neutral auxiliary lipid for cationic liposomes. When used in combination with cationic phospholipids, it can improve the transfection efficiency of naked siRNA[1]. DOPE can be used in combination with DA, DOTAP or DC-cholesterol to enhance the transfection efficiency of liposomes and lipoplexes. The exact ratio used and the transfection efficiency depend on the cell line used[2, 3]. DOPE is a synthetic analog of phosphatidylethanolamine (PE) containing 18:1 fatty acids at the sn-1 and sn-2 positions[4]. DOPE can be used as an emulsifier to promote the transport of DNA-liposome complexes across membranes[5]. DOPE can undergo structural changes as the pH value decreases[6].
References:
[1] Uemura Y, Naoi T, Kanai Y, et al. The efficiency of lipid nanoparticles with an original cationic lipid as a siRNA delivery system for macrophages and dendritic cells[J]. Pharmaceutical Development and Technology, 2019, 24(3): 263-268.
[2] Kim J, Kim J Y, Kim H, et al. Increasing transfection efficiency of lipoplexes by modulating complexation solution for transient gene expression[J]. International Journal of Molecular Sciences, 2021, 22(22): 12344.
[3] Kim B K, Hwang G B, Seu Y B, et al. DOTAP/DOPE ratio and cell type determine transfection efficiency with DOTAP-liposomes[J]. Biochimica Et Biophysica Acta (BBA)-Biomembranes, 2015, 1848(10): 1996-2001.
[4] Pedersen P J. Liposomal Drug Delivery of Anticancer Agents: Synthesis, Biophysical Characterization and Biological Studies of Enzyme Sensitive Phospholipid Prodrugs[J]. 2010.
[5] Geusens B, Strobbe T, Bracke S, et al. Lipid-mediated gene delivery to the skin[J]. European journal of pharmaceutical sciences, 2011, 43(4): 199-211.
[6] Mochizuki S, Kanegae N, Nishina K, et al. The role of the helper lipid dioleoylphosphatidylethanolamine (DOPE) for DNA transfection cooperating with a cationic lipid bearing ethylenediamine[J]. Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Biomembranes, 2013, 1828(2): 412-418.
DOPE(Dioleoylphosphatidylethanolamine)是阳离子脂质体的中性辅助脂质,与阳离子磷脂结合使用,能够提高裸siRNA的转染效率[1]。DOPE与DA、DOTAP或DC-胆固醇组合使用,能够增强脂质体和lipoplex转染效率,使用的确切比例和转染效率取决于所用的细胞系[2, 3]。DOPE是磷脂酰乙醇胺(PE)的合成类似物,在sn-1和sn-2位含有18:1的脂肪酸[4]。DOPE可用作乳化剂,促进DNA-脂质体复合物跨膜运输[5]。DOPE能够随着pH值降低而发生结构转变[6]。
本方案仅提供一个指导,请根据您的具体需要进行修改。
1.使用DOPE制备囊泡[1](来源文献,仅供参考)
(1)将二油酰磷脂酰胆碱(DOPC)、二油酰磷脂酰丝氨酸(DOPS)、二油酰磷脂酸(DOPA)和二油酰磷脂酰乙醇胺(DOPE)溶解在氯仿中,在玻璃小瓶中以适当的摩尔比合并脂质溶液。
(2)在氮气流下蒸发氯仿,在真空下充分干燥脂质混合物。
(3)将脂质混合物用10mM HEPES(pH 7.6)、150mM NaCl再水化,涡旋混合,并进行至少10次冻融循环,其中将悬浮液在液氮中冷冻并在温超声水浴中解冻,以产生单层囊泡。囊泡悬浮液储存在-20°C。
(4)使用前,在微型挤出机中使用100nm滤膜挤出解冻的囊泡。
注意:为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
References:
[1]Smith C M, Li A, Krishnamurthy N, et al. Phosphatidylserine binding directly regulates TIM-3 function[J]. Biochemical Journal, 2021, 478(17): 3331-3349.
Cas No. | 4004-05-1 | SDF | |
Canonical SMILES | CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@H](CO[P](O)(=O)OCCN)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC | ||
分子式 | C41H78NO8P | 分子量 | 744.05 |
溶解度 | 7.5mg/ml in Chloroform | 储存条件 | Store at -20°C |
General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限:-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度,请将管子加热至37℃,然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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Shipping Condition | 评估样品解决方案:配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸:配备RT,或根据请求配备蓝冰。 |
制备储备液 | |||
1 mg | 5 mg | 10 mg | |
1 mM | 1.344 mL | 6.72 mL | 13.44 mL |
5 mM | 0.2688 mL | 1.344 mL | 2.688 mL |
10 mM | 0.1344 mL | 0.672 mL | 1.344 mL |
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量) | ||||||||||
给药剂量 | mg/kg | 动物平均体重 | g | 每只动物给药体积 | ul | 动物数量 | 只 | |||
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方) | ||||||||||
% DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
计算重置 |
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL saline,混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的;
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
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