FITC, Fluorescein isothiocyanate
(Synonyms: 异硫氰酸荧光素酯; Fluorescein 5-isothiocyanate) 目录号 : GC12317
FITC (Fluorescein isothiocyanate)异硫氰酸荧光素是生物研究中最常用的一种绿色荧光素衍生物，广泛用于流式细胞术实验中对蛋白质、细胞核和亚核颗粒进行染色。FITC的最大激发光/发射光波长分别为495/519 nm。
Cas No.:3326-32-7
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >95.00%
- COA (Certificate Of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
本方案仅提供一个指导，请根据您的具体需要进行修改。
1. 溶液配制
（1）工作液：建议使用DMSO或PBS溶液溶解FITC，配置浓度为1-2mg/mL的FITC溶液。
注意：工作浓度请根据实际情况调整或参阅文献自行设置梯度浓度进行摸索，以获得最佳条件。FITC必须现配现用，避光放置。
2.使用FITC标记脂蛋白（LDL）的步骤[1](来自文献,仅做参考)
（1）LDL纯化：从人血浆中通过超速离心纯化LDL，使用KBr调整血浆密度（1.019 < d < 1.063）。
（2）FITC标记：将10 μL的FITC溶液（2 mg/mL）加入1 mL的LDL溶液中。LDL溶液的缓冲液为0.1 M NaHCO3，pH 9.0。混合物在室温下缓慢摇动2小时。
（3）去除未结合的染料：使用Sephadex G-25柱进行凝胶过滤，平衡缓冲液为无EDTA的PBS。检测所有分馏物的蛋白质含量，使用牛血清白蛋白作为标准。
3. 使用FITC标记细胞步骤[2](来自文献,仅做参考)
（1）细胞处理：过夜培养细胞，用PBS清洗三次。
（2）FITC标记：将细胞加入到0.1 M NaHCO3缓冲液中，pH 9.0，同时加入溶解在PBS中的FITC（1 mg/mL）。将装有细胞的试管用锡纸包裹，固定在转盘机上室温下旋转30分钟。
（3）洗涤细胞：用PBS清洗细胞，直到上清液无色。
注意：该实验方案为使用FITC标记蛋白和细胞提供指导。可以根据其他文献和具体实验要求进行调整。
References:
[1]Uribe K B, Chemello K, Larrea-Sebal A, et al. A systematic approach to assess the activity and classification of PCSK9 variants[J]. International Journal of Molecular Sciences, 2021, 22(24): 13602.
[2]He Y, Liu Y, Yang Y, et al. elk1/miR-462-731 feedback loop regulates macrophages polarization and phagocytosis in grass carp (Ctenopharyngodon idella)[J]. Frontiers in Immunology, 2022, 13: 946857.
FITC (Fluorescein isothiocyanate) is the most commonly used green fluorescent dye derivative in biological research and is widely used in flow cytometry experiments to stain proteins, cell nuclei and subnuclear particles[1]. The maximum excitation/emission wavelengths of FITC are 495/519 nm respectively[2]. The isothiocyanate group of FITC can combine with amino, sulfhydryl, imidazole, tyrosyl, carbonyl and other groups on proteins to achieve protein labeling including antibodies and lectins[3]. FITC has the characteristics of high absorption rate and excellent fluorescence quantum yield[4]. FITC can also be used as a protein fluorescent tracer to quickly identify pathogens by labeling antibodies, or for micro-sequencing of proteins and peptides[5].
References:
[1] Wulff S, Martin K, Vandergaw A, et al. Guide to flow cytometry[M]. Dako Cytomation., 2006.
[2] Jaklová Dytrtová J, Moslova K, Jakl M, et al. Fluorescein isothiocyanate stability in different solvents[J]. Monatshefte für Chemie-Chemical Monthly, 2021, 152: 1299-1306.
[3] Immunochemistry of Proteins: Volume 1[M]. Springer Science & Business Media, 2012.
[4]Zhang X F, Zhang J, Liu L. Fluorescence properties of twenty fluorescein derivatives: lifetime, quantum yield, absorption and emission spectra[J]. Journal of fluorescence, 2014, 24: 819-826.
[5]Vu T. Synthesis, characterisation and biological activity of FITC-insulin for the development of an artificial pancreas[J]. 2021.
FITC (Fluorescein isothiocyanate)异硫氰酸荧光素是生物研究中最常用的一种绿色荧光素衍生物，广泛用于流式细胞术实验中对蛋白质、细胞核和亚核颗粒进行染色[1]。FITC的最大激发光/发射光波长分别为495/519 nm[2]。FITC的异硫氰酸基团可与蛋白质上的氨基、巯基、咪唑、酪氨酰、羰基等基团相结合，从而实现包括抗体，凝集素在内的蛋白标记[3]。FITC具有高吸收率和优良的荧光量子产率等特点[4]。FITC还可用作蛋白质荧光示踪剂，通过标记抗体而快速鉴定病原体，或是用于蛋白质和多肽的微量测序[5]。
| Cas No. | 3326-32-7 | SDF | |
| 别名 | 异硫氰酸荧光素酯; Fluorescein 5-isothiocyanate | ||
| 化学名 | 3',6'-dihydroxy-5-isothiocyanato-3H-spiro[isobenzofuran-1,9'-xanthen]-3-one | ||
| Canonical SMILES | S=C=NC1=CC(C(OC23C4=C(OC5=C3C=CC(O)=C5)C=C(O)C=C4)=O)=C2C=C1 | ||
| 分子式 | C21H11NO5S | 分子量 | 389.38 |
| 溶解度 | ≥ 38.9mg/mL in DMSO | 储存条件 | Store at 2-8°C, protect from light, stored under nitrogen |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.5682 mL | 12.8409 mL | 25.6819 mL |
| 5 mM | 0.5136 mL | 2.5682 mL | 5.1364 mL |
| 10 mM | 0.2568 mL | 1.2841 mL | 2.5682 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。