Glutaryl-Gly-Arg-AMC
目录号 : GA21910
Glutaryl-Gly-Arg-AMC是一种荧光底物,是尿激酶纤溶酶原激活剂(uPA)的肽底物,荧光团AMC的最大激发/发射波长为380nm/460nm。
Cas No.:65147-16-2
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
Glutaryl-Gly-Arg-AMC is a fluorescent substrate and a peptide substrate of urokinase plasminogen activator (uPA). The maximum excitation/emission wavelength of the fluorophore AMC is 380nm/460nm[1, 2]. Glutaryl-Gly-Arg-AMC can be used to detect protease activity, especially trypsin and trypsin-like enzymes[3, 4].
References:
[1] Wu G, Mazzitelli B A, Quek A J, et al. Tranexamic acid is an active site inhibitor of urokinase plasminogen activator[J]. Blood advances, 2019, 3(5): 729-733.
[2] Dewey S. Fluctuating Effects of Diabetes Mellitus Type 1 and 2 on the Ubiquitin Proteasome System in Two Rodent Models: Proteasome Inhibition is Not the Magic Answer[M]. University of California, Davis, 2014.
[3] Xu J H, Jiang Z, Solania A, et al. A commensal dipeptidyl aminopeptidase with specificity for N-terminal glycine degrades human-produced antimicrobial peptides in vitro[J]. ACS chemical biology, 2018, 13(9): 2513-2521.
[4] Maffioli E, Jiang Z, Nonnis S, et al. High-resolution mass spectrometry-based approaches for the detection and quantification of peptidase activity in plasma[J]. Molecules, 2020, 25(18): 4071.
Glutaryl-Gly-Arg-AMC是一种荧光底物,是尿激酶纤溶酶原激活剂(uPA)的肽底物,荧光团AMC的最大激发/发射波长为380nm/460nm[1, 2]。Glutaryl-Gly-Arg-AMC能够用于检测蛋白酶活性,特别是胰蛋白酶(Trypsin)和类胰蛋白酶(Trypsin-like enzymes)[3, 4]。
本方案仅提供一个指导,请根据您的具体需要进行修改。
1. 溶液配制
(1)储存液:用DMSO溶解Glutaryl-Gly-Arg-AMC,配制10mM母液。
注意:未使用的储存液分装后在-20℃或-80°C避光保存,避免反复冻融。
(2)工作液:用实验缓冲液(如D-PBS)稀释母液到所需的工作浓度,例如:50μM[1]。
注意:最佳的工作浓度请根据实际情况调整或参阅文献自行设置梯度浓度进行摸索。工作液必须现配现用。
2. 采用Glutaryl-Gly-Arg-AMC测定牛胰蛋白酶活性[1](来自文献,仅做参考)
(1)反应体系:在96孔板中依次加入以下试剂:50μL D-PBS(含2mM DTT)、50μL Glutaryl-Gly-Arg-AMC(终浓度50μM)、50μL牛胰蛋白酶(终浓度100nM)。每个样品设3个复孔,同时设置空白对照(不加酶)。
(2)反应条件:将96孔板置于37°C孵育30min。
(3)荧光检测:使用荧光酶标仪(激发波长360nm,发射波长460nm)检测荧光强度。记录荧光值变化,计算酶活性。
References:
[1] Xu J H, Jiang Z, Solania A, et al. A commensal dipeptidyl aminopeptidase with specificity for N-terminal glycine degrades human-produced antimicrobial peptides in vitro[J]. ACS chemical biology, 2018, 13(9): 2513-2521.
Cas No. | 65147-16-2 | SDF | |
分子式 | C23H30N6O7 | 分子量 | 502.53 |
溶解度 | Soluble in DMSO | 储存条件 | Store at -20°C |
General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限:-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度,请将管子加热至37℃,然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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Shipping Condition | 评估样品解决方案:配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸:配备RT,或根据请求配备蓝冰。 |
制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
1 mM | 1.9899 mL | 9.9497 mL | 19.8993 mL |
5 mM | 0.398 mL | 1.9899 mL | 3.9799 mL |
10 mM | 0.199 mL | 0.995 mL | 1.9899 mL |
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量) | ||||||||||
给药剂量 | mg/kg | 动物平均体重 | g | 每只动物给药体积 | ul | 动物数量 | 只 | |||
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方) | ||||||||||
% DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
计算重置 |
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL saline,混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的;
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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