Sulfo-SANPAH
(Synonyms: 磺基-SANPAH) 目录号 : GD21201Sulfo-SANPAH 是一种伯胺-硝基苯叠氮交联剂。
Cas No.:102568-43-4
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00%
- COA (Certificate Of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
本方案仅提供一个指导，请根据您的具体需要进行修改。
1.溶液配制
（1）工作液：称量固体，用Milli-Q水或其他适合的缓冲液配制所需的工作浓度。
注意：固体避光保存在-20°C或-80°C。最佳的工作浓度请根据实际情况调整或参阅文献自行设置梯度浓度进行摸索。工作液必须现配现用。
2.采用Sulfo-SANPAH进行细胞外基质蛋白-聚丙烯酰胺缀合[1](来自文献,仅做参考)
（1）在HBS缓冲液中稀释所选细胞外基质蛋白（例如，胶原蛋白）至最终浓度为100μg/mL，准备所需体积的工作溶液。
（2）从聚丙烯酰胺培养皿中移除所有缓冲液。
（3）在Milli-Q水中将Sulfo-SANPAH稀释至0.5 mg/mL。立即使用移液器将大约5 mL稀释液均匀涂布于聚丙烯酰胺凝胶表面。由于Sulfo-SANPAH在水中迅速水解，此步骤需快速完成。
（4）打开培养皿盖，将聚丙烯酰胺皿暴露在365 nm紫外线下照射10分钟，以激活Sulfo-SANPAH。处理完毕后，聚丙烯酰胺应呈现深橙色。
（5）使用HBS缓冲液彻底清洗聚丙烯酰胺凝胶3次，以去除未反应的Sulfo-SANPAH。
（6）将蛋白质溶液直接加至聚丙烯酰胺表面，保证液体完全覆盖凝胶。将培养皿转移至37°C的细胞培养箱中，孵育过夜或至少2-3小时。
（7）与蛋白质溶液孵育后，用HBS洗涤一次并更换为新鲜的HBS。
（8）将处理后的聚丙烯酰胺凝胶在HBS中二次孵育过夜或至少2-3小时，以稳定蛋白质缀合。
（9）处理完的培养皿可在4°C下，使用封口膜或保鲜膜密封保存数周。
注意：选择的细胞外基质蛋白应根据目标细胞系进行选择并验证其适用性。
在操作过程中应始终保持无菌技术，以避免污染。
Sulfo-SANPAH is a primary amine-nitrophenyl azide crosslinker[1]. It is a heterobifunctional crosslinker with one end containing a phenyl azide group and the other end featuring an amine-reactive N-hydroxysuccinimide ester, with an arm length of 18.2 A[2]. Sulfo-SANPAH is photosensitive and can form covalent bonds between proteins or other biomolecules upon activation with ultraviolet light[3]. Sulfo-SANPAH can be used for crosslinking cell surface proteins, and it is highly soluble in water. For instance, Sulfo-SANPAH can be employed to facilitate the covalent bonding of cell adhesion proteins to the surface of culture mediums, thereby studying cell migration and interactions with the extracellular matrix[4].
References:
[1] Hong Y, Krsko P, Libera M. Protein surface patterning using nanoscale PEG hydrogels[J]. Langmuir, 2004, 20(25): 11123-11126.
[2] Uckun F M, Evans W E, Forsyth C J, et al. Biotherapy of B-cell precursor leukemia by targeting genistein to CD19-associated tyrosine kinases[J]. Science, 1995, 267(5199): 886-891.
[3] Kumai J, Sasagawa S, Horie M, et al. A novel method for polyacrylamide gel preparation using N-hydroxysuccinimide-acrylamide ester to study cell-extracellular matrix mechanical interactions[J]. Frontiers in Materials, 2021, 8: 637278.
[4]Millar-Haskell C S, Gleghorn J P. A Large-format Polyacrylamide Gel with Controllable Matrix Mechanics for Mammalian Cell Culture and Conditioned Media Production[J]. Bio-protocol, 2023, 13(17).
Sulfo-SANPAH 是一种伯胺-硝基苯叠氮交联剂[1]。Sulfo-SANPAH 是异型双功能交联剂，一端含有苯基叠氮基，另一端含有胺反应性N-羟基琥珀酰亚胺，臂长18.2A[2]。Sulfo-SANPAH具有光敏性，通过紫外光照射激活后，能在蛋白质或其他生物大分子间形成共价键[3]。Sulfo-SANPAH可用于细胞表面蛋白质交联，水溶性良好。例如，Sulfo-SANPAH可以用于促进细胞粘附蛋白与培养基表面的共价结合，从而研究细胞迁移和细胞外基质的相互作用[4]。
| Cas No. | 102568-43-4 | SDF | |
| 别名 | 磺基-SANPAH | ||
| 分子式 | C16H18N6O9S | 分子量 | 470.41 |
| 溶解度 | 60mg/mL in DMSO (Need ultrasonic) | 储存条件 | -20℃ |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.1258 mL | 10.629 mL | 21.2581 mL |
| 5 mM | 0.4252 mL | 2.1258 mL | 4.2516 mL |
| 10 mM | 0.2126 mL | 1.0629 mL | 2.1258 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。