Green DND-26
目录号 : GC64677
Green DND-26 用于标记酸性溶酶体以确定细胞分布。Green DND-26 是一种荧光染料，可对活细胞中的酸性隔室进行染色，并已被证明可选择性地积聚在肺泡 II 型 (AT2) 细胞的层状体中。
Cas No.:220524-71-0
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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Green DND-26 is used to mark acidic lysosomes to determine the cellular distribution. Green DND-26 is a fluorescent dye that stains acidic compartments in live cells and has been shown to selectively accumulate in lamellar bodies in alveolar type II (AT2) cells in the lung[1][2].
[1]. Sun B, et al. Acid-Activatable Transmorphic Peptide-Based Nanomaterials for Photodynamic Therapy. Angew Chem Int Ed Engl. 2020;59(46):20582-20588. [2]. Van der Velden JL, et al. LysoTracker is a marker of differentiated alveolar type II cells. Respir Res. 2013;14(1):123. Published 2013 Nov 11.
本方案仅提供一个指导，请根据您的具体需要进行修改。
1、制备Green DND-26染色液
（1）取出冻存的染色液，恢复至室温后，通过瞬时离心将染液集中在管底。
（2）工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基或PBS)稀释储存液，配制浓度为50-75 nM的工作液。
注意:
① 请根据实际情况调整工作液浓度，现用现配；
② 为了减少背景过高或过载产生的假阳性现象，染料的浓度应尽可能低。
2、细胞悬浮染色
（1）悬浮细胞：悬浮细胞经4°C、1000g离心3-5分钟，弃去上清液，使用PBS清洗两次，每次5分钟。
（2）贴壁细胞：使用PBS清洗两次，加入胰酶消化细胞，消化完成后经1000g离心3-5min。
（3）使用0.5-1mL工作液重悬约106个细胞，37℃避光孵育30分钟至2小时。不同细胞最佳孵育时间不同，请根据具体实验需求自行摸索。
（4）孵育结束后，经1000g离心5分钟，去除上清液，加入PBS清洗2-3次，每次5分钟。
（5）使用预温的细胞培养基重悬孵育细胞。
3、细胞贴壁染色
（1）在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。
（2）从培养基中移走盖玻片，吸出过量的培养基，将盖玻片放在潮湿的环境中。
（3）从盖玻片的一角加入100uL的染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
（4）37℃避光孵育30分钟至2小时。不同细胞最佳孵育时间不同，请根据具体实验需求自行摸索。
（5）孵育结束后吸弃染料工作液，加入PBS清洗2-3次，使用预温的培养基孵育细胞。
4、荧光检测：Green DND-26的最大吸收波光/发射光为504/511nm。
注意事项：
1、荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
| Cas No. | 220524-71-0 | SDF | Download SDF |
| 分子式 | C18H25BF2N4O | 分子量 | 362.23 |
| 溶解度 | DMSO : 125 mg/mL (345.08 mM; Need ultrasonic) | 储存条件 | Store at -20°C |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.7607 mL | 13.8034 mL | 27.6068 mL |
| 5 mM | 0.5521 mL | 2.7607 mL | 5.5214 mL |
| 10 mM | 0.2761 mL | 1.3803 mL | 2.7607 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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- Purity: >99.00%
- COA (Certificate Of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet