IPTG (Isopropyl β-D-thiogalactoside)
(Synonyms: 异丙基-beta-D-硫代半乳糖吡喃糖苷,Isopropyl β-D-thiogalactoside) 目录号 : GC30002
IPTG（异丙基-β-D-硫代半乳糖苷）是一种常用的诱导剂，用于诱导大肠杆菌中的乳糖操纵子（Lac）下游基因及对应蛋白的表达。
Cas No.:367-93-1
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
IPTG (isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside) is a commonly used inducer used to induce the expression of lactose operon (Lac) downstream genes and corresponding proteins in Escherichia coli [1]. When using pET, pLac or other expression systems controlled by Lac operators, IPTG as an inducer can effectively initiate large-scale expression of target genes [2]. The mechanism of action of IPTG is that its structure is similar to lactose and can bind to the lactose operon repressor protein (LacI), thereby preventing LacI from binding to Lac [3]. IPTG is not a harmless inducer, it exacerbates the toxicity of haloalkane substrates and causes significant damage to host cells [4].
References:
[1] Hansen L H , Knudsen S , Rensen S J .The Effect of the lacY Gene on the Induction of IPTG Inducible Promoters, Studied in Escherichia coli and Pseudomonas fluorescens[J].Current Microbiology, 1998, 36(6):341-7.
[2] Saïda F, Uzan M, Odaert B, et al. Expression of highly toxic genes in E. coli: special strategies and genetic tools[J]. Current Protein and Peptide Science, 2006, 7(1): 47-56.
[3] Marbach A , Bettenbrock K. lac operon induction in Escherichia coli: Systematic comparison of IPTG and TMG induction and influence of the transacetylase LacA[J].Journal of Biotechnology, 2012, 157(1):82-88.
[4]Exacerbation of substrate toxicity by IPTG in Escherichia coli BL21(DE3) carrying a synthetic metabolic pathway[J].Microbial Cell Factories, 2015, 14(1):201.
IPTG（异丙基-β-D-硫代半乳糖苷）是一种常用的诱导剂，用于诱导大肠杆菌中的乳糖操纵子（Lac）下游基因及对应蛋白的表达[1]。在使用pET、pLac或其他Lac运算子控制的表达系统时，IPTG作为诱导剂可以有效启动目标基因的大量表达[2]。IPTG的作用机制在于其结构与乳糖相似，能够结合到乳糖操纵子阻遏蛋白（LacI）上，从而使LacI无法结合到Lac[3]。IPTG不是一种无害的诱导剂，它加剧了卤代烷烃底物的毒性，并对宿主细胞造成明显的损害[4]。
本方案仅提供一个指导，请根据您的具体需要进行修改。
1.溶液配制
（1）制备储存液：将低温保存的固体平衡至室温，使用无菌水溶解IPTG，配置浓度为1 M的储存液，过滤灭菌。
注意:未使用的储存液分装后在-20℃或-80°C避光保存，避免反复冻融。
（2）工作液：通常使用的IPTG浓度应该在0.1到1 mM之间。
注意：最佳的工作浓度请根据实际情况调整或参阅文献自行设置梯度浓度进行摸索。工作液必须现配现用。
2.使用IPTG诱导重组PcOSM在大肠杆菌中的表达[1](来自文献,仅做参考)
（1）转化：用含有重组PcOSM的pET 100/D-TOPO载体转化BL-21感受态细胞。
（2）接种与培养：在5 mL LB液体培养基中加入氨苄青霉素（最终浓度100 µg/mL，使用无菌移液管吸头接种携带重组PcOSM的BL-21大肠杆菌细胞，在37°C下以220 rpm剧烈振荡培养，直到OD600达到0.6至0.8。
（3）IPTG诱导：向培养物中加入 IPTG（最终浓度1 mM）进行诱导。
（4）收获细胞：继续在诱导后的温度条件下培养8小时或过夜，以最大限度提高目标蛋白的产量。在4°C下以4,000g离心20分钟来收获细胞，除去上清液并保留细胞沉淀。
注意：该实验方案仅提供一项IPTG用于诱导蛋白表达实验的参考，最佳IPTG浓度和诱导时间可能需要针对特定蛋白进行优化。请进行必要的对照实验，以评估诱导效率和细胞毒性。始终确保使用无菌技术操作。
| Cas No. | 367-93-1 | SDF | |
| 别名 | 异丙基-beta-D-硫代半乳糖吡喃糖苷,Isopropyl β-D-thiogalactoside | ||
| Canonical SMILES | O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1SC(C)C | ||
| 分子式 | C9H18O5S | 分子量 | 238.3 |
| 溶解度 | DMSO : ≥ 60 mg/mL (251.78 mM) | 储存条件 | Store at -20°C,stored under nitrogen |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 4.1964 mL | 20.982 mL | 41.9639 mL |
| 5 mM | 0.8393 mL | 4.1964 mL | 8.3928 mL |
| 10 mM | 0.4196 mL | 2.0982 mL | 4.1964 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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