KOD DNA Polymerase
目录号 : GE10004来自极端耐热古生菌 Thermococcus kodakaraensis (KOD )的 DNA 聚合酶一种新的高保真快速耐热 DNA 聚合酶,该酶的扩增速度更是 Pfu DNA 聚合酶的 4 倍，保真性更好，耐热温度更高，是效率最⾼的热稳定 DNA 聚合酶。
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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来自极端耐热古生菌 Thermococcus kodakaraensis (KOD )的 DNA 聚合酶一种新的高保真快速耐热 DNA 聚合酶,该酶的扩增速度更是 Pfu DNA 聚合酶的 4 倍，保真性更好，耐热温度更高，是效率最⾼的热稳定 DNA 聚合酶。KOD DNA 聚合酶具有 3’-5’外切酶活性，即校正功能，保证能快速地识别并纠正错误掺入的核苷酸。本品没有 5’-3’ 外切活性。
特征
优良的保真性
实际测序结果表明，在 KOD DNA Polymerase 的 PCR 过程中，产生碱基错配的频率更低，KOD DNA Polymerase 的保真性是 Taq DNA Polymerase 或其他公司 Long PCR 用酶的约 20倍以上。
出色的延伸性（扩增可能链长）
以λDNA 为模板可以扩增出 40kb ，以人基因组 DNA 为模板可扩增出 24kb ，以 cDNA 为模板可扩增出 12kb。
超群的扩增效率
与以往的 PCR 酶相比，得率大幅提高，因此即便模板量很少也可进行扩增。
高可靠性（PCR 成功率）
对高 GC 含量的目的片段、全血等可直接扩增，PCR 成功率非常高。
运输和储存
本产品干冰运输，可在-15℃~ -25℃保存两年。
PCR 实验步骤
（1）PCR 反应液的配制
配制反应液前，请充分混匀除 KOD DNA Polymerase 以外的各试剂。冻结的试剂请于完全解冻后再使用｡
（2）反应体系（50 µL/反应）
|
组分 |
终浓度 |
用量 |
|
5×PCR Buffer |
1 × |
10 µL |
|
dNTP Mix |
200 µM |
1 µL |
|
上游引物 |
0.2 µM |
1 µL |
|
下游引物 |
0.2 µM |
1 µL |
|
DNA 模板 |
- |
x µL |
|
KOD DNA Polymerase |
0.04U/µL |
0.4 µL |
|
无菌水 |
- |
Up to 50 µL |
推荐模板用量
|
模板种类 |
推荐用量 |
|
基因组 DNA |
10 ng-200 ng |
|
质粒或病毒 DNA |
10 pg-50 ng |
|
cDNA |
1-5 μL（不超过 PCR 总体积的 1/10） |
（3）反应程序
①三步法 PCR
*根据引物 TM 值设置退火温度，如引物的 TM 值≥72℃ , 可删除退火步骤，直接进行后续的延伸步骤（两步法 PCR），如果需要，可建立一个温度梯度，寻找引物与模板结合的最 适温度。另外，退火温度直接决定扩增特异性，如发现扩增特异性差，可适当提高退火温度。
*对于大多数模板，30s/kb 即可有效扩增，对于一些复杂模板，可提高延伸时间至 30~60s/kb
②两步法 PCR
注意事项
1. 请不要使用含尿嘧啶的引物和模板。
2. 为了提高扩增成功率和产量，清使用高质量的模板。
3. 可室温溶解，溶解后宜存放于冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即置于-20ºC 保存。
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
| Components | GE10004-01 | GE10004-02 | GE10004-03 | GE10004-04 |
| KOD DNA Polymerase | 50 μL | 100 μL | 200 μL | 500 μL |
| 5 × PCR Buffer | 500 μL | 500 μL | 1 mL | 1 mL*3 |
Quality Control & SDS
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Purity: >95.00%
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