L 012 sodium salt
目录号 : GC13908
L 012 sodium salt是一种基于鲁米诺的化学发光探针。
Cas No.:143556-24-5
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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L 012 sodium salt is a luminol-based chemiluminescent probe. Detects NAPDH oxidase-derived reactive oxygen and nitrogen species (ROS and RNS). Active in vitro and in vivo[1].
Reference:
[1].Daiber A, August M, Baldus S, et al. Measurement of NAD (P) H oxidase-derived superoxide with the luminol analogue L-012[J]. Free Radical Biology and Medicine, 2004, 36(1): 101-111.
L 012 sodium salt是一种基于鲁米诺的化学发光探针。可检测 NAPDH 氧化酶衍生的活性氧和氮物质 (ROS 和 RNS)。在体外和体内均有活性[1]。
本方案仅提供指导，请根据您的实际需要进行修改。
1.溶液配制
取适量L 012 sodium salt粉末溶于纯水中，使成20mM储存液，母液冷冻保存，避免反复冻融。在后续实验中，可使用PBS（pH 7.5）进行稀释为工作液。
2.细胞ROS成像[1]：
（1）细胞处理：将细胞在白色透明底96孔培养板上生长至90%汇合，使用不同浓度H2O2刺激细胞。
（2）L 012 sodium salt孵育：将细胞培养基替换为补充有L 012 sodium salt （400µM）的PBS (pH 7.4)溶液中进行孵育5-10min。
（3）荧光检测：使用酶标仪在450nm处检测荧光值。
2.体内ROS成像[2]：
（1）制备工作液：取适量L 012 sodium salt母液溶于PBS中，使成30-60mg/kg。
（2）动物处理：提前异氟烷麻醉小鼠，并将小鼠成像处进行脱毛。
（3）将溶解好的L 012 sodium salt腹腔注射于小鼠体中，每只250μL。
（4）在注射L 012 sodium salt后，使用生物发光成像仪检测发光信号，每两分钟采集一次图像，总共采集50min。
Reference:
[1] Al Ghouleh I, Meijles D N, Mutchler S, et al. Binding of EBP50 to Nox organizing subunit p47 phox is pivotal to cellular reactive species generation and altered vascular phenotype[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2016, 113(36): E5308-E5317.
[2] Rice, Christopher M., et al.Tumour-elicited neutrophils engage mitochondrial metabolism to circumvent nutrient limitations and maintain immune suppression. Nature communications 9.1 (2018): 5099.
| Cas No. | 143556-24-5 | SDF | |
| 化学名 | sodium 8-amino-5-chloro-4-hydroxy-7-phenylpyrido[3,4-d]pyridazin-1-olate | ||
| Canonical SMILES | ClC1=NC(C2=CC=CC=C2)=C(N)C3=C1C(O)=NN=C3[O-].[Na+] | ||
| 分子式 | C13H8CIN4NaO2 | 分子量 | 310.67 |
| 溶解度 | <15.53mg/ml in Water; <31.07mg/ml in DMSO | 储存条件 | Store at -20°C |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 3.2188 mL | 16.0942 mL | 32.1885 mL |
| 5 mM | 0.6438 mL | 3.2188 mL | 6.4377 mL |
| 10 mM | 0.3219 mL | 1.6094 mL | 3.2188 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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