λ Protein phosphatase
(Synonyms: λ Lambda;蛋白磷酸酶) 目录号 : GC74232λ Protein phosphatase是由噬菌体Lambda编码的丝氨酸/苏氨酸磷酸酶。
Cas No.:401941-75-1
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
GlpBio生产的Lambda Protein Phosphatase (重组λ蛋白磷酸酶),即λ Protein Phosphatase,是一种锰离子(Mn2+)依赖的重组表达纯化的磷酸蛋白酶,可以对磷酸化的丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸和组氨酸残基进行脱磷酸反应。
本产品是大肠杆菌重组表达的带6×His标签的重组λ磷酸酶。该磷酸酶由λ噬菌体开放阅读框ORF221所编码,编码产物共包含221个氨基酸残基。
Lambda Protein Phosphatase可以用于蛋白的去磷酸化,从而可以用于研究蛋白磷酸化与其活性和结构的关系,以及验证蛋白磷酸化位点抗体的特异性等。
酶活性单位定义:在30℃ pH7.5条件下反应1分钟,能够水解1nmol p-nitrophenyl phosphate所需的酶量定义为一个活性单位。
GlpBio生产的Lambda Protein Phosphatase酶活性鉴定结果参考图1。
图1. Lambda Protein Phosphatase酶活测定实验图。左图:pNP标准曲线。右图:Lambda Protein Phosphatase按照30、40、50、80、100、200、500倍稀释后,在50µl反应体系中的酶量分别为0.27µg、0.20µg、0.16µg、0.10µg、0.08µg、0.04µg、0.016µg,并与100mM pNPP在1×Lambda Protein Phosphatase Buffer和1×MnCl2中在30℃反应5min后,加入12.5µl 3M NaOH终止反应,测定产生的pNP在405nm吸光度,并根据pNP标准曲线,计算Lambda Protein Phosphatase酶活性。不同批次检测出来的酶活性会略有差别。
酶分子量大小:约26kDa。
纯度:纯度大于95%。
Lambda Protein Phosphatase存储液组成为:50mM This-HCl (pH7.5),100mM NaCl,0.1mM MnCl2,0.1mM EGTA,2mM dithiothreitol (DTT),0.01%Brij35,50%(v/v)甘油。
10× Lambda Protein Phosphatase Buffer组成为:500mM Hepes (pH7.5),100mM NaCl,20mM DTT,0.1% Brij35。
10× MnCl2组成为:10mM MnCl2。
失活:在50mM EDTA存在的条件下,65℃加热1小时可使Lambda Protein Phosphatase失活。
使用说明:
1.Lambda Protein Phosphatase对不同蛋白的脱磷酸化反应有不同活性,所以在实际应用中,我们建议对酶浓度和反应时间进行优化。反应体系中,反应缓冲液为1× Lambda Protein Phosphatase Buffer并且同时加入1× MnCl2 (最终浓度为1mM)。
2.以一般的去磷酸化反应为例:在50μl反应体系中,100U的Lambda Protein Phosphatase在30分钟内可以除去相当于5μM的磷酸化的蛋白(单磷酸化)中约100%的磷酸。
Cas No. | 401941-75-1 | SDF | |
别名 | λ Lambda;蛋白磷酸酶 | ||
分子式 | 分子量 | ||
溶解度 | 储存条件 | ||
General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限:-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度,请将管子加热至37℃,然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
||
Shipping Condition | 评估样品解决方案:配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸:配备RT,或根据请求配备蓝冰。 |
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量) | ||||||||||
给药剂量 | mg/kg | 动物平均体重 | g | 每只动物给药体积 | ul | 动物数量 | 只 | |||
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方) | ||||||||||
% DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
计算重置 |
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL saline,混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的;
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
- View current batch: