LDS-751
目录号 : GC30134
LDS 751是一种细胞膜通透性的核酸染色剂，用于从无核和受损的有核细胞中区分完整的有核细胞，以及在混合的中性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞中用流式细胞术区分不同的细胞类型，LDS 751的激发/发射光分别为543/712nm（与DNA结合时）。
Cas No.:181885-68-7
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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LDS 751 is a cell membrane permeable nucleic acid stain used to distinguish intact nucleated cells from anucleated and damaged nucleated cells, and to distinguish different cell types in mixed neutrophils, lymphocytes and monocytes by flow cytometry. The excitation/emission light of LDS 751 is 543/712nm respectively (when bound to DNA). The maximum excitation wavelength of LDS 751 binding to dsDNA is ~543nm, which can be excited by a 488nm argon ion laser. It is particularly suitable for multicolor analysis due to its longer maximum emission wavelength (~712 nm). Binding to dsDNA causes a fluorescence enhancement of ~20 times. Thiazole orange (mainly binds RNA, GC30038) and LDS751 (mainly binds DNA) are used to distinguish red blood cells, platelets, reticulocytes and nucleated cells.
LDS 751是一种细胞膜通透性的核酸染色剂，用于从无核和受损的有核细胞中区分完整的有核细胞，以及在混合的中性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞中用流式细胞术区分不同的细胞类型，LDS 751的激发/发射光分别为543/712nm（与DNA结合时）。LDS 751与dsDNA结合的最大激发波长~543nm，能用488nm氩离子激光器来激发，由于具有较长的最大发射波长(~712 nm)而特别适用于多色分析。与dsDNA的结合引起~20倍的荧光增强。噻唑橙(主要结合RNA，GC30038)和LDS751(主要结合DNA)用来区分红细胞、血小板、网织红血球和有核细胞。
本方案仅提供一个指导，请根据您的具体需要进行修改。
1. 制备LDS 751染色液
(1)配置LDS 751染料储存液：使用5.297mL DMSO充分溶解25mg LDS 751，即得10mM的储存液。
注意：LDS 751储存液建议分装后于 -20℃避光保存，避免反复冻融。
(2)制备LDS 751工作液:使用预热的无血清培养基或缓冲液(如HBSS或PBS)稀释储存液，配制浓度为10μM的LDS 751工作液。
注意：请根据实际情况调整 LDS 751 工作液浓度，现用现配。
1. 细胞染色
1.1 悬浮细胞（以6孔板为例）
（1）悬浮细胞经1000g离心3-5min。弃去上清液，使用PBS清洗两次，每次5分钟。
（2）加入1mL的LDS 751工作液染料工作液，室温避光孵育15-60 min。
（3）孵育结束后，经1000g离心5分钟，去除上清液，加入PBS清洗2-3次，每次5分钟。
（4）使用无血清细胞培养基或PBS重悬细胞，通过荧光酶标板或流式细胞技术进行观察。
2.2 贴壁细胞
（1）在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。
（2）从培养基中移走盖玻片，吸出过量的培养基，将盖玻片放在潮湿的环境中。
（3）从盖玻片的一角加入100uL的LDS 751染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞，室温避光孵育15-60 min。
（4）吸弃染料工作液，使用培养液洗盖玻片2~3次，通过荧光酶标板或流式细胞技术进行观察。
3. 荧光酶标板检测：LDS 751的激发/发射光分别为543/712nm（与DNA结合）
注意事项：
（1） 对于固定的细胞或组织样品的染色，固定后需漂洗去除固定剂；
（2） 为减缓荧光淬灭，建议使用抗荧光淬灭封片剂；
（3） LDS 751对人体有一定刺激性，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
第一次实验务必尝试几种染色浓度，以确定最佳工作浓度。浓度较高时可能引起细胞结构的非特异性染色。
| Cas No. | 181885-68-7 | SDF | |
| Canonical SMILES | CC[N+]1=C2C=CC(N(C)C)=CC2=CC=C1/C=C/C=C/C3=CC=C(N(C)C)C=C3.O=Cl(=O)([O-])=O | ||
| 分子式 | C25H30ClN3O4 | 分子量 | 471.98 |
| 溶解度 | DMSO : 83.33 mg/mL (176.55 mM; ultrasonic and warming and heat to 60°C) | 储存条件 | Store at -20°C,stored under argon,unstable in solution, ready to use. |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
||
| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.1187 mL | 10.5937 mL | 21.1873 mL |
| 5 mM | 0.4237 mL | 2.1187 mL | 4.2375 mL |
| 10 mM | 0.2119 mL | 1.0594 mL | 2.1187 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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- COA (Certificate Of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
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