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MitoSOX Red

目录号 : GC68230

MitoSOX Red是一种靶向线粒体的活细胞荧光探针,最大激发光/发射光为510/580 nm。

MitoSOX Red Chemical Structure

Cas No.:1003197-00-9

规格 价格 库存 购买数量
50ug (50ug in 13uL DMSO)
¥434.00
现货
100ug (100ug in 26uL DMSO)
¥700.00
现货
500ug (500ug in 130uL DMSO)
¥2,100.00
现货

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Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.

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Description

MitoSOX Red is a live cell fluorescent probe targeting mitochondria with maximum excitation/emission light of 510/580 nm. MitoSOX Red has cell membrane permeability and can quickly and selectively target mitochondria after entering cells. After entering mitochondria, MitoSOX Red is easily oxidized by superoxide and produces strong red fluorescence after combining with nucleic acids in mitochondria. MitoSOX Red can be used as a fluorescent indicator to specifically detect superoxide[1-2].

Dihydroethidium, also called hydroethidine (HE), can be oxidized by reactive species and subsequently binds to DNA to produce fluorescence. MitoSOX Red is a dihydroethidium derivative with a cationic triphenylphosphonium moiety. This positively charged probe rapidly accumulates in mitochondria and can therefore be used to monitor superoxide/ROS production within mitochondria by fluorometry, microscopy or flow cytometry[3]. For example, in NK cells, MitoSOX red can observe the distribution of mitochondrial ROS[1]. Confocal microscopy imaging shows that in H9c2 cells treated with paraquat, the fluorescence intensity of MitoSOX Red-labeled mitochondria increases significantly[4].

MitoSOX Red

References:
[1] Jin F, Wu Z, Hu X, Zhang J, Gao Z, Han X, Qin J, Li C, Wang Y. The PI3K/Akt/GSK-3β/ROS/eIF2B pathway promotes breast cancer growth and metastasis via suppression of NK cell cytotoxicity and tumor cell susceptibility. Cancer Biol Med. 2019 Feb;16(1):38-54.
[2] Milliken A S, Nadtochiy S M, Brookes P S. Inhibiting succinate release worsens cardiac reperfusion injury by enhancing mitochondrial reactive oxygen species generation[J]. Journal of the American Heart Association, 2022, 11(13): e026135.
[3] Kauffman ME, Kauffman MK, Traore K, Zhu H, Trush MA, Jia Z, Li YR. MitoSOX-Based Flow Cytometry for Detecting Mitochondrial ROS. React Oxyg Species (Apex). 2016;2(5):361-370.
[4] Mukhopadhyay P, Rajesh M, Yoshihiro K, et al. Simple quantitative detection of mitochondrial superoxide production in live cells[J]. Biochemical and biophysical research communications, 2007, 358(1): 203-208.

MitoSOX Red是一种靶向线粒体的活细胞荧光探针,最大激发光/发射光为510/580 nm。MitoSOX Red具有细胞膜渗透性,进入细胞后能够快速且选择性地靶向线粒体,进入线粒体后MitoSOX Red易被超氧化物氧化,与线粒体内核酸结合后,产生强烈的红色荧光。MitoSOX Red可以作为荧光指示剂,特异性检测超氧化物[1-2]

二氢乙锭,也称为氢化乙锭 (HE),可以被活性物质氧化,随后与DNA结合产生荧光。MitoSOX Red是带有阳离子三苯基鏻部分的二氢乙锭衍生物。这种带正电的探针在线粒体中快速积累,因此可用于通过荧光测定、显微镜或流式细胞术检测线粒体内超氧化物/ROS的产生[3],例如,在NK细胞中,MitoSOX Red可以观察线粒体ROS的分布[1];共聚焦显微成像显示,在用百草枯处理的 H9c2 细胞中,MitoSOX Red标记的线粒体荧光强度显著增加[4]

实验参考方法

本方案仅提供一个指导,请根据您的具体需要进行修改。
1、制备MitoSOX Red染色液
(1)本产品以5mM的DMSO储存液形式提供,建议在首次使用前对产品进行离心,分装后在管内充氮气,于-20℃或-80℃避光保存。
(2)染料工作液:用合适的缓冲液(如:无血清培养基或PBS)稀释储存液,配制浓度为1-10μM的MitoSOX Red工作液。
注意: 请根据实际情况调整及优化工作液浓度,现用现配。
2、细胞悬浮染色(以6孔板为例)
(1)悬浮细胞经1000g离心3-5min。弃去上清液,使用PBS清洗两次,每次5分钟。
(2)贴壁细胞使用PBS清洗两次,加入胰酶消化细胞,消化完成后经1000g离心3-5min。
(3)加入1mL染料工作液重悬细胞,室温避光孵育5-30min分钟,不同细胞最佳培养时间不同。
(4)孵育结束后,经1000g离心5分钟,去除上清液,加入PBS清洗2-3次,每次5分钟。
(5)使用无血清细胞培养基或PBS重悬细胞,通过荧光显微镜或流式细胞技术进行观察。
3、细胞贴壁染色
(1)在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。
(2)从培养基中移走盖玻片,吸出过量的培养基,将盖玻片放在潮湿的环境中。
(3)从盖玻片的一角加入100μL染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞,室温避光孵育5-30min分钟。
(4)吸弃染料工作液,使用培养液清洗盖玻片2~3次,每次5分钟。
4、显微镜检测:MitoSOX Red的最大激发光/发射光为396/610nm。MitoSOX Red染料也可以在510nm处激发,如果MitoSOX Red染料在396nm而非510nm处激发,可能是该染料对线粒体超氧化物的标记更具选择性。

注意事项:
(1)荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
(2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

化学性质

Cas No. 1003197-00-9 SDF Download SDF
分子式 C43H43IN3P 分子量 759.7
溶解度 DMSO : 150 mg/mL (197.45 mM; Need ultrasonic) 储存条件 Store at -20°C,protect from light,stored under nitrogen
General tips 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
储备液的保存方式和期限:-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。
为了提高溶解度,请将管子加热至37℃,然后在超声波浴中震荡一段时间。
Shipping Condition 评估样品解决方案:配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸:配备RT,或根据请求配备蓝冰。

溶解性数据

制备储备液
1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.3163 mL 6.5815 mL 13.1631 mL
5 mM 0.2633 mL 1.3163 mL 2.6326 mL
10 mM 0.1316 mL 0.6582 mL 1.3163 mL
  • 摩尔浓度计算器

  • 稀释计算器

  • 分子量计算器

质量
=
浓度
x
体积
x
分子量
 
 
 
*在配置溶液时,请务必参考产品标签上、MSDS / COA(可在Glpbio的产品页面获得)批次特异的分子量使用本工具。

计算

动物体内配方计算器 (澄清溶液)

第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
给药剂量 mg/kg 动物平均体重 g 每只动物给药体积 ul 动物数量
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方)
% DMSO % % Tween 80 % saline
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