MQAE
(Synonyms: 解毒喹) 目录号 : GC30035
A fluorescent chloride indicator dye
Cas No.:162558-52-3
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
1-(Ethoxycarbonylmethyl)-6-methoxyquinolinium (bromide) is a fluorescent indicator dye that can be used to measure intracellular and extracellular chloride concentrations (absorption/emission max: 350/460 nm).1 It detects the ion via diffusion-limited collisional quenching.
1.Sabnis, R.W.Handbook of biological dyes and stains: Synthesis and industrial applications(2010)
本方案仅提供一个指导，请根据您的具体需要进行修改。
1、 制备MQAE染色液：
（1）配置染料储存液：将MQAE溶于乙腈和水的混合物（1：1），配置成500 mM的母液，使用0.22μm滤膜过滤除菌。储存液分装后在-20 °C避光保存。
（2）使用Krebs-hepes缓冲液稀释储备液，获得浓度为5-10 mM的MQAE 工作溶液。
Krebs-hepes缓冲液：20 mM HEPES、128 mM NaCl、2.5 mM KCl、2.7 mM CaCl2、1 mM MgCl2、16 mM 葡萄糖，pH 7.4
注意：请根据实际情况调整 MQAE 工作液浓度，现用现配。
2、细胞悬浮染色(以6 孔板为例)
（1）悬浮细胞经1000g离心3-5min。弃去上清液，使用Krebs-hepes缓冲液清洗两次，每次5分钟。
（2）贴壁细胞使用Krebs-hepes缓冲液清洗两次，加入胰酶消化细胞，消化完成后经1000g离心3-5min。
（3）加入1mL染料工作液重悬细胞，室温避光孵育30-60min分钟，不同细胞最佳培养时间不同。
（4）孵育结束后，经1000g离心5分钟，去除上清液，加入PBS清洗2-3次，每次5分钟。
（5）使用无血清细胞培养基或PBS重悬细胞，通过显微镜进行观察。
3、细胞贴壁染色
（1）在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。
（2）从培养基中移走盖玻片，吸出过量的培养基，将盖玻片放在潮湿的环境中。
（3）从盖玻片的一角加入100μL染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞，室温避光孵育30-60min分钟。
（4）吸弃染料工作液，使用PBS清洗盖玻片2~3次，每次5分钟。
4、显微镜检测：使用光学显微镜或流式细胞仪对染色细胞进行检测，MQAE的最大激发光/发射光为350/460 nm。
注意事项：
1）荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
References:
[1]. Chenchen Ma,et. Colloidal Particles in Tuna Head Soup: Chemical Localization, Structural Change, and Antioxidant Property. 2021 Mar 29:8:638390. doi: 10.3389/fnut.2021.638390. eCollection 2021.
[2]. Yukiko Ikeuchi,et. Measurement of [Cl-]i unaffected by the cell volume change using MQAE-based two-photon microscopy in airway ciliary cells of mice. 2018 Mar;68(2):191-199. doi: 10.1007/s12576-018-0591-y. Epub 2018 Jan 13.
| Cas No. | 162558-52-3 | SDF | |
| 别名 | 解毒喹 | ||
| Canonical SMILES | COC1=CC2=CC=C[N+](CC(OCC)=O)=C2C=C1.[Br-] | ||
| 分子式 | C14H16BrNO3 | 分子量 | 326.19 |
| 溶解度 | DMSO : ≥ 35 mg/mL (107.30 mM) | 储存条件 | Store at -20°C, protect from light |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 3.0657 mL | 15.3285 mL | 30.657 mL |
| 5 mM | 0.6131 mL | 3.0657 mL | 6.1314 mL |
| 10 mM | 0.3066 mL | 1.5328 mL | 3.0657 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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