Rhodamine 6G (Basic Red 1)
(Synonyms: 罗丹明6G; Basic Red 1) 目录号 : GC30090
Rhodamine 6G是一种细胞渗透性阳离子荧光探针，特异性识别线粒体膜电位，最大激发光/发射光为525/560nm。
Cas No.:989-38-8
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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Rhodamine 6G (R6 G) is a lipophilic fluorescent cationic dye mainly used to detect the mitochondrial membrane potential (Δψ m) of cultured cells and isolated mitochondria[1]. Rhodamine dye is a cell-permeable fluorescent probe that specifically recognizes mitochondrial membrane potential and thus accumulates in mitochondria. Rhodamine dye has low toxicity to cells at a certain concentration, so it is often used to detect mitochondria in animal cells, plant cells, and microorganisms[2].
References:
[1]. Said H Audi,et. Quantification of mitochondrial membrane potential in the isolated rat lung using rhodamine 6G. 2020 Apr 1;128(4):892-906. doi: 10.1152/japplphysiol.00789.2019. Epub 2020 Mar 5.
[2]. Emaus, R. K., Grunwald, R., & Lemasters, J. J. (1986). Rhodamine 123 as a probe of transmembrane potential in isolated rat-liver mitochondria: spectral and metabolic properties. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Bioenergetics, 850(3), 436–448.
Rhodamine 6G（R6 G）是一种亲脂性荧光阳离子染料，主要用于检测培养的细胞和分离的线粒体的线粒体膜电位（Δψ m ）[1]。Rhodamine染料是一种细胞渗透性荧光探针，特异性识别线粒体膜电位，从而在线粒体中积累。在一定浓度下，罗丹明染料对细胞的毒性较低，因此常用于检测动物细胞、植物细胞和微生物中的线粒体[2]。
本方案仅提供一个指导，请根据您的具体需要进行修改。
1、制备Rhodamine 6G染色液
（1）染料储存液:使用DMSO或ethanol将Rhodamine 6G溶解成5-10mM的储存液。配置好的储存液于-4℃避光保存。
（2）染料工作液:用合适的缓冲液(如:无血清培养基，HBSS或PBS)稀释储存液，配制浓度为1-20μM的染料工作液。
注意: 请根据实际情况调整工作液浓度，现用现配。
2、细胞悬浮染色(以6 孔板为例)
（1）悬浮细胞经1000g离心3-5min。弃去上清液，使用PBS清洗两次，每次5分钟。
（2）贴壁细胞使用PBS清洗两次，加入胰酶消化细胞，消化完成后经1000g离心3-5min。
（3）加入1mL染料工作液重悬细胞，室温避光孵育5-30min分钟，不同细胞最佳培养时间不同。
（4）孵育结束后，经1000g离心5分钟，去除上清液，加入PBS清洗2-3次，每次5分钟。
（5）使用无血清细胞培养基或PBS重悬细胞，通过荧光显微镜或流式细胞技术进行观察。
3、细胞贴壁染色
（1）在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。
（2）从培养基中移走盖玻片，吸出过量的培养基，将盖玻片放在潮湿的环境中。
（3）从盖玻片的一角加入100uL染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞，室温避光孵育30-60min分钟。
（4）吸弃染料工作液，使用培养液清洗盖玻片2~3次，每次5分钟。
4、显微镜检测：Rhodamine 6G的最大激发光/发射光为525/560nm。
注意事项：
1）荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
References:
[1].Safwan Obeidat,et. A multi-source portable light emitting diode spectrofluorometer. 2008 Mar;62(3):327-32. doi: 10.1366/000370208783759722.
| Cas No. | 989-38-8 | SDF | |
| 别名 | 罗丹明6G; Basic Red 1 | ||
| Canonical SMILES | CC1=CC2=C(C3=CC=CC=C3C(OCC)=O)C4=C([O+]=C2C=C1NCC)C=C(NCC)C(C)=C4.[Cl-] | ||
| 分子式 | C28H31ClN2O3 | 分子量 | 479.01 |
| 溶解度 | DMSO : ≥ 100 mg/mL (208.76 mM) | 储存条件 | 4°C, protect from light |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
||
| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
 |
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.0876 mL | 10.4382 mL | 20.8764 mL |
| 5 mM | 0.4175 mL | 2.0876 mL | 4.1753 mL |
| 10 mM | 0.2088 mL | 1.0438 mL | 2.0876 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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