Rhodamine B (Basic Violet 10)
(Synonyms: 罗丹明B; Basic Violet 10; Brilliant Pink B; Rhodamine O; Tetraethylrhodamine) 目录号 : GC30172
Rhodamine B (Basic Violet 10)是一种荧光染料，在水中用作示踪染料，以确定流动和运输的速率和方向，最大激发光/发射光为568/583nm。
Cas No.:81-88-9
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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Rhodamine B (Basic Violet 10) is a fluorescent dye used as a tracer dye in water to determine the rate and direction of flow and transport, with excitation/emission maxima at 568/583nm[1, 2]. Rhodamine B is commonly used in fluorescence microscopy, flow cytometry, fluorescence correlation spectroscopy and ELISA in biotechnology experiments. It can be used to label organelles or cell membranes, and can also be coupled to antibodies to detect the presence and quantity of specific proteins[3, 4]. Rhodamine B is commonly used in industry for dyeing textiles, paper, soap, leather, and pharmaceuticals[5].
References:
[1] Field M S, Wilhelm R G, Quinlan J F, et al. An assessment of the potential adverse properties of fluorescent tracer dyes used for groundwater tracing[J]. Environmental Monitoring and Assessment, 1995, 38: 75-96.
[2] Stobiecka M, Hepel M. Multimodal coupling of optical transitions and plasmonic oscillations in rhodamine B modified gold nanoparticles[J]. Physical Chemistry Chemical Physics, 2011, 13(3): 1131-1139.
[3] Brulikova L, Krupkova S, Labora M, et al. Synthesis and study of novel pH-independent fluorescent mitochondrial labels based on Rhodamine B[J]. RSC advances, 2016, 6(28): 23242-23251.
[4] Ullman E F, Schwarzberg M, Rubenstein K E. Fluorescent excitation transfer immunoassay. A general method for determination of antigens[J]. Journal of Biological Chemistry, 1976, 251(14): 4172-4178.
[5] Farhan A M, Zaghair A M, Abdullah H I. Adsorption Study of Rhodamine–B Dye on Plant (Citrus Leaves)[J]. Baghdad Science Journal, 2022, 19(4): 0838-0838.
Rhodamine B (Basic Violet 10)是一种荧光染料，在水中用作示踪染料，以确定流动和运输的速率和方向，最大激发光/发射光为568/583nm[1, 2]。Rhodamine B在生物技术实验中常用于荧光显微镜、流式细胞术、荧光相关光谱和ELISA，可用于标记细胞器或细胞膜，还可以通过偶联到抗体上检测特定蛋白质的存在和数量[3, 4]。Rhodamine B在工业上常用于染色纺织品、纸张、肥皂、皮革和药品[5]。
本方案仅提供一个指导，请根据您的具体需要进行修改。
1. 溶液配制
（1）储存液：用DMSO溶解Rhodamine B，配置浓度为10mM的储存液。
注意:建议将未使用的储存液分装后在-20℃或-80°C避光保存，避免反复冻融。
（2）工作液：用实验缓冲液稀释储存液，到所需的工作浓度。
注意：最佳的工作浓度请根据实际情况调整或参阅文献自行设置梯度浓度进行摸索。工作液必须现配现用。
2. 细胞悬浮染色(以6孔板为例)
（1）悬浮细胞经1000g离心3-5min。弃去上清液，使用PBS清洗2次，每次5min。
（2）贴壁细胞使用PBS清洗2次，加入胰酶消化细胞，消化完成后经1000g离心3-5min。
（3）加入1mL Rhodamine B工作液重悬细胞，室温避光孵育5-30min，不同细胞最佳培养时间不同。
（4）孵育结束后，经1000g离心5min，去除上清液，加入PBS清洗2-3次，每次5min。
（5）使用无血清细胞培养基或PBS重悬细胞，通过荧光显微镜或流式细胞技术进行观察。
3. 细胞贴壁染色
（1）在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。
（2）从培养基中移走盖玻片，吸出过量的培养基，将盖玻片放在潮湿的环境中。
（3）从盖玻片的一角加入100µL Rhodamine B工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞，室温避光孵育30-60min。
（4）吸弃染料工作液，使用培养液清洗盖玻片2-3次，每次5min。通过荧光显微镜进行观察。
4.用Rhodamine B标记南极假丝酵母脂肪酶B（CALB）步骤[1](来自文献,仅做参考)
（1）在DMSO中制备5mg/mL的Rhodamine B溶液，取0.4mL。
（2）在Na2CO3-NaHCO3缓冲液（50mM，pH 9）中制备5mg/mL的CALB溶液，取4mL。
（3）将0.4mL的Rhodamine B溶液加入到4mL的CALB溶液中，将混合物在4°C下搅拌12h。
（4）用50mM的NH4Cl终止反应。
（5）将反应混合物在4°C下用PBS（50mM，pH 7）透析48h，以去除未反应的染料。
References:
[1] Xu W, Fu Z, Chen G, et al. Graphene oxide enabled long-term enzymatic transesterification in an anhydrous gas flux[J]. Nature communications, 2019, 10(1): 2684.
| Cas No. | 81-88-9 | SDF | |
| 别名 | 罗丹明B; Basic Violet 10; Brilliant Pink B; Rhodamine O; Tetraethylrhodamine | ||
| Canonical SMILES | CCN(C1=CC2=[O+]C3=C(C=CC(N(CC)CC)=C3)C(C4=CC=CC=C4C(O)=O)=C2C=C1)CC.[Cl-] | ||
| 分子式 | C28H31ClN2O3 | 分子量 | 479.01 |
| 溶解度 | DMSO : 6 mg/mL (12.53 mM) | 储存条件 | Store at 4°C, protect from light, stored under nitrogen |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
 |
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.0876 mL | 10.4382 mL | 20.8764 mL |
| 5 mM | 0.4175 mL | 2.0876 mL | 4.1753 mL |
| 10 mM | 0.2088 mL | 1.0438 mL | 2.0876 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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