Senescence β-Galactosidase Staining Kit
目录号 : GC26569细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒(Senescence β-Galactosidase Staining Kit)是一种基于衰老时衰老相关β-半乳糖苷酶(senescence-associated β-galactosidase; SA-β-Gal)活性水平上调而对衰老细胞或组织进行染色检测的试剂盒。
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒(Senescence β-Galactosidase Staining Kit)是一种基于衰老时衰老相关β-半乳糖苷酶(senescence-associated β-galactosidase; SA-β-Gal)活性水平上调而对衰老细胞或组织进行染色检测的试剂盒。在普通的光学显微镜下就可以观测到细胞或组织的衰老情况。本试剂盒可以用于培养细胞的衰老检测，也可以用于冰冻切片的衰老检测。
绝大多数正常细胞被认为仅有有限的分裂能力，在不能分裂后就进入衰老(senescence)状态。此时细胞仍然是存活的，但细胞的基因和蛋白的表达谱发生了很大改变。衰老的细胞不能在一些常规的刺激下再诱导细胞分裂，并且衰老细胞的细胞周期分布也比较特殊，不同于一些损伤诱导的细胞休眠，也不同于细胞生长接触抑制的情况。衰老细胞通常体积变大，并表达在pH6.0时有高酶活性的β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)。细胞衰老也被认为是生物体抑制肿瘤的一种方式，同时也是生物体老化(aging)的一种潜在原因。
细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒，以X-Gal为底物，在衰老特异性的β-半乳糖苷酶催化下会生成深蓝色产物。从而在光学显微镜下很容易观察到变成蓝色的表达β-半乳糖苷酶的细胞或组织。
使用说明：
1. 对于贴壁细胞：
a. 对于6孔板中培养的细胞，吸除细胞培养液，用PBS或HBSS洗涤1次，加入1毫升β-半乳糖苷酶染色固定液，室温固定15分钟。对于其它类型的培养板，固定液及后续溶液的用量参照此比例进行操作。
b. 吸除细胞固定液，用PBS或HBSS洗涤细胞3次，每次3分钟。
c. 吸除PBS或HBSS，每孔加入1毫升染色工作液。染色工作液的配制方法参考表1。
| β-半乳糖苷酶染色液A | 10μl |
| β-半乳糖苷酶染色液B | 10μl |
| β-半乳糖苷酶染色液C | 930μl |
| X-Gal溶液 | 50μl |
d. 37℃孵育过夜，可以用parafilm或保鲜膜封住6孔板防止蒸发。注意：37℃孵育不能在二氧化碳培养箱中进行。
e. 普通光学显微镜下观察。如不能及时观察计数，可以去除染色工作液，加入2毫升PBS，4℃可以保存数天；或者加上封片液封片后，4℃可以保存较长时间。注：如果有结晶形成，请参考注意事项中的建议使用70%乙醇进行洗涤处理。
2. 对于悬浮细胞：
a. 离心收集细胞至1.5ml离心管内，用PBS或HBSS洗涤1次，加入1毫升β-半乳糖苷酶染色固定液，室温固定15分钟。固定时可以在摇床上缓慢摇动，以避免细胞结成团块。
b. 离心，吸除细胞固定液，用PBS或HBSS洗涤细胞3次，每次3分钟。
c. 离心，吸除PBS或HBSS，每管加入0.5-1毫升染色工作液。染色工作液的配制方法参考表1。
d. 37℃孵育过夜。注意：37℃孵育不能在二氧化碳培养箱中进行。
e. 取部分染色后的细胞，滴加到载玻片上或6孔板内，普通光学显微镜下观察。如不能及时观察计数，可以离心，去除染色工作液，然后加入1毫升PBS，4℃可以保存数天。如果离心，取细胞用于涂片，加上封片液封片后，4℃可以保存较长时间。
注：如果有结晶形成，请参考注意事项中的建议使用70%乙醇进行洗涤处理。
3. 对于冰冻切片：
a. 冰冻切片先进行复温，用PBS浸泡洗涤组织3次，每次不少于5分钟。
b. 加入适当体积的β-半乳糖苷酶染色固定液，以充分盖住组织为宜，室温固定不少于15分钟。
c. 用PBS浸泡洗涤组织3次，每次不少于5分钟。
d. 吸除PBS，加入适当量的染色工作液。染色工作液的配制方法参考表1。
e. 37℃孵育过夜，可以用parafilm或保鲜膜封住防止蒸发。最好把整个切片浸泡在染色工作液中。
注意：37℃孵育不能在二氧化碳培养箱中进行。
f. 普通光学显微镜下观察。如不能及时观察，加上封片液封片后4℃可以保存较长时间。
注：如果有结晶形成，请参考注意事项中的建议使用70%乙醇进行洗涤处理。
| Item | Components | Quantity |
| GC26569-1 | β-Galactosidase Staining Fixative | 100ml |
| GC26569-2 | X-Gal Solution | 5ml |
| GC26569-3 | β-Galactosidase Staining Solution A | 1ml |
| GC26569-4 | β-Galactosidase Staining Solution B | 1ml |
| GC26569-5 | β-Galactosidase Staining Solution C | 100ml |
| 应用&特点 | 细胞或组织衰老检测。 |
| 运输方式 | 蓝冰运输。 |
| 储存条件 | -20℃保存，一年有效。 |
| 用途 | 仅供研究使用!不能用于人体。 |