Streptavidin MagBeads
目录号 : GC26178Streptavidin MagBeads是由链霉亲和素共价包被的超顺磁珠,适用于生物素化蛋白质、多肽、抗体和寡聚核苷酸的纯化、蛋白质相互作用等研究。
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
Quality Control & SDS
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使用说明(以100μl纯磁珠体积为例):
1、Streptavidin MagBeads的准备:
(1) 摇晃或涡旋小瓶,使磁珠完全重悬。
(2) 将100μl磁珠转移到新管中(建议将枪头斜剪,扩大入口)。
(3) 将试管放在磁力架上收集磁珠,吸弃上清。
(4) 在试管中加入0.5 ml洗涤缓冲液,颠倒试管数次混匀。使用磁力架收集磁珠并丢弃上清液,重复此步骤两次。
注意:应用于核酸时,洗涤缓冲液推荐使用TES Buffer;应用于抗体/蛋白质时,洗涤缓冲液推荐使用PBS(pH 7.4)。
2、生物素化分子的固定
相关试剂
① 使用比例:2-3mg生物素化样品:1ml体积的纯磁珠。
② 结合/洗涤缓冲液:核酸:TES 缓冲液;蛋白质/抗体:PBS(pH 7.4)。
③ 洗脱缓冲液:8 M胍•HCl(pH 1.5)。
(1) 操作步骤
① 将磁珠重悬于100μl结合/洗涤缓冲液中。
② 将生物素化样品加入步骤1准备好的磁珠中,轻轻颠倒混匀。
③ 将试管在室温下晃动孵育一小时(振荡器或漩涡仪)。
④ 将试管转移至磁力架上,收集磁珠,弃去上清液。(如有必要,保留上清液进行分析)
⑤ 向试管中加入1 ml结合/洗涤缓冲液并充分混匀,使用磁力架收集磁珠并弃去上清液,重复洗涤3次。
⑥ 在合适的缓冲液中重悬至所需浓度以供下游使用。
1、抗原纯化
(1) 相关试剂
① 使用比例:2-3 mg生物素化抗体:1ml体积的纯磁珠
② 结合/洗涤缓冲液:0.1 M磷酸缓冲液(含0.15 M NaCl,pH 7.2)
③ 洗脱缓冲液:0.1 M 甘氨酸•HCl(pH 2.5-2.8)
④ 中和缓冲液:1 M Tris•HCl(pH 8.5)
(2) 操作步骤
① 向步骤1准备好的磁珠中加入100μl结合/洗涤缓冲液重悬。
② 将生物素化抗体溶液添加到磁珠中,轻轻颠倒混匀。
③ 将试管在室温下晃动孵育一小时(振荡器或漩涡仪)。
④ 将试管转移至磁力架上,收集磁珠,弃去上清液。(如有必要,保留上清液进行分析)
⑤ 向试管中加入1ml结合/洗涤缓冲液并充分混匀,使用磁力架收集磁珠并弃去上清液,重复洗涤3次。
⑥ 加入100μl结合/洗涤缓冲液重悬磁珠。
⑦ 将抗原样品加入试管中,轻轻颠倒混合,室温孵育30min或4℃孵育过夜。
⑧ 向试管中加入1ml结合/洗涤缓冲液清洗磁珠,使用磁力架收集磁珠并弃去上清液,重复洗涤3次。
⑨ 向试管中加入100μl洗脱缓冲液,充分混匀,室温孵育5min。
⑩ 使用磁力架收集磁珠并保存含有目标抗原的上清液。
⑪ 加入中和缓冲液调节pH,每50μl洗脱液中加入5μl中和缓冲液。
注意:
1、Streptavidin MagBead的建议保存温度为2–8℃,切勿冷冻本产品!
2、在储存和使用时,Streptavidin MagBead需保持在液体悬浮液中,干燥会严重干扰磁珠的性能和结合能力。
3、使用前请重新悬浮磁珠。
取用过程需小心谨慎,避免细菌/真菌污染。
Streptavidin MagBeads are superparamagnetic beads with a diameter of about 45-100μm covalently coated with high-purity streptavidin. The magnetic bead part consists of agarose and a magnetite core encapsulated therein, and streptavidin is covalently bound to the surface of the magnetic bead.
Streptavidin has a molecular weight of 53kDa and each molecule has four biotinylation binding sites. When mixed with a sample containing a biotinylated molecule, Streptavidin MagBeads can bind to the biotin on the molecule in a short incubation time, and then the magnetic beads bound to the molecule are separated by a magnetic separation rack, thereby indirectly capturing the target molecule. Streptavidin and biotin have very high affinity (Kd=10-15) and are widely used in the biological field.
Streptavidin MagBeads are provided in the form of a 25% phosphate buffered saline (PBS) slurry, pH7.4, containing 20% ethanol.
The recommended storage temperature of Streptavidin MagBead is 2–8℃. Do not freeze the product. During storage and use, Streptavidin MagBeads must be kept in liquid suspension. Drying will seriously interfere with the performance and binding capacity of the magnetic beads.
Streptavidin MagBeads是由高纯度链霉亲和素共价包被的直径约45-100μm的超顺磁珠。磁珠部分由琼脂糖以及其中封装的磁铁矿芯组成,磁珠表面共价结合链霉亲和素。
链霉亲和素分子量为53kDa,每个分子有四个生物素化结合位点。在与含有生物素化分子的样品混合时,Streptavidin MagBeads能够在较短孵育时间内与分子上的生物素结合,然后用磁性分离架分离结合分子的磁珠,从而间接捕获靶标分子。链霉亲和素和生物素具有非常高的亲和力(Kd=10-15),在生物领域有广泛应用。
Streptavidin MagBeads以25%的磷酸盐缓冲盐水(PBS)浆液形式提供,pH7.4,含有20%乙醇。
Streptavidin MagBead的建议保存温度为2–8℃,请勿冷冻本产品。在储存和使用时,Streptavidin MagBead需保持在液体悬浮液中,干燥会严重干扰磁珠的性能和结合能力。
Cas No. | SDF | ||
分子式 | 分子量 | ||
溶解度 | 储存条件 | 2–8°C | |
General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限:-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度,请将管子加热至37℃,然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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Shipping Condition | 评估样品解决方案:配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸:配备RT,或根据请求配备蓝冰。 |
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量) | ||||||||||
给药剂量 | mg/kg | 动物平均体重 | g | 每只动物给药体积 | ul | 动物数量 | 只 | |||
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方) | ||||||||||
% DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
计算重置 |
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL saline,混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的;
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。