Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-AMC
(Synonyms: N-琥珀酰基-亮氨酰-亮氨酰-缬氨酰-酪氨酸-7-胺基-4-甲基香豆素) 目录号 : GC44962
Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-AMC 是一种四肽化合物，是20S蛋白酶体、胰凝乳蛋白酶样蛋白酶和钙蛋白酶的荧光底物，其最大激发波长和发射波长分别为345 nm和445 nm。
Cas No.:94367-21-2
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-AMC is a tetrapeptide compound that serves as a fluorogenic substrate for the 20S proteasome [1], chymotrypsin-like proteases [2], and calpains [3], with maximum excitation and emission wavelengths of 345 nm and 445 nm, respectively. Proteases such as calpains and 20S proteasome specifically recognize and cleave the "Leu-Leu-Val-Tyr" sequence, releasing the AMC fluorophore [4]，this makes it a valuable tool for studying calpain activity and proteasomal degradation.
References:
[1]. Stein RL, Melandri F, Dick L. Kinetic characterization of the chymotryptic activity of the 20S proteasome. Biochemistry. 1996 Apr 2;35(13):3899-908.
[2]. Gardner RC, Assinder SJ, Christie G, et al. Characterization of peptidyl boronic acid inhibitors of mammalian 20 S and 26 S proteasomes and their inhibition of proteasomes in cultured cells. Biochem J. 2000 Mar 1;346 Pt 2(Pt 2):447-54.
[3]. Debiasi RL, Squier MK, Pike B, et al. Reovirus-induced apoptosis is preceded by increased cellular calpain activity and is blocked by calpain inhibitors. J Virol. 1999 Jan;73(1):695-701. doi: 10.1128/JVI.73.1.695-701.1999.
[4]. Sasaki, T., T. Kikuchi, N. Yumoto, et al. 1984.Comparative specificity and kinetic studies on porcine calpain I and calpainII with naturally occurring peptides and synthetic fluorogenic substrates.J. Biol. Chem. 259:12489–12494.
Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-AMC 是一种四肽化合物，是20S蛋白酶体[1]、胰凝乳蛋白酶样蛋白酶[2]和钙蛋白酶 [3]的荧光底物，其最大激发波长和发射波长分别为345 nm和445 nm。钙蛋白酶和20S蛋白酶体能够特异性识别并切割"Leu-Leu-Val-Tyr"序列，从而释放出AMC荧光基团[4]，这使其成为研究钙蛋白酶活性和蛋白酶体降解的宝贵工具。
Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-AMC 实验方法
1.制备储备液：将 Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-AMC 溶解于 DMSO 中，配制浓度为 1-10 mM 的储备液。将储备液在 -20°C 避光保存。
2.制备 1X 反应缓冲液：配制含有 25 mM HEPES（pH 7.5）、10 mM DTT、0.1% CHAPS、0.5 mM PMSF、2 μl/ml 抑肽酶和 20 μM 荧光底物的反应缓冲液。
3.制备工作液：使用反应缓冲液将 Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-AMC 稀释至 20 μM。
4. 样本制备：准备含有待测蛋白酶的样本裂解液或者纯化好的 20S 和 26S 蛋白酶体。
5.将 50 μl 待测蛋白酶的样本裂解液加入到 0.5 ml 工作液中，在 37°C 孵育 30 分钟。
6. 荧光检测：使用荧光计测量荧光信号，激发波长为 345 nm，发射波长为 445 nm。
本方案仅供参考，请根据具体实验需要进行修改。
References:
[1]. Tadlock L, Yamagiwa Y, Hawker J, Marienfeld C, Patel T. Transforming growth factor-beta inhibition of proteasomal activity: a potential mechanism of growth arrest. Am J Physiol Cell Physiol. 2003 Aug;285(2):C277-85. doi: 10.1152/ajpcell.00550.2002. Epub 2003 Mar 19. PMID: 12646415.
| Cas No. | 94367-21-2 | SDF | |
| 别名 | N-琥珀酰基-亮氨酰-亮氨酰-缬氨酰-酪氨酸-7-胺基-4-甲基香豆素 | ||
| Canonical SMILES | CC(C1=CC=C(C=C1O2)NC([C@H](CC3=CC=C(C=C3)O)NC([C@@H](NC([C@@H](NC([C@@H](NC(CCC(O)=O)=O)CC(C)C)=O)CC(C)C)=O)C(C)C)=O)=O)=CC2=O | ||
| 分子式 | C40H53N5O10 | 分子量 | 763.9 |
| 溶解度 | DMF: 30 mg/ml,DMSO: 30 mg/ml,DMSO:PBS(pH7.2) (1:1): 0.5 mg/ml,Ethanol: 20 mg/ml | 储存条件 | Store at -20°C, protect from light, stored under nitrogen |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
 |
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.3091 mL | 6.5454 mL | 13.0907 mL |
| 5 mM | 0.2618 mL | 1.3091 mL | 2.6181 mL |
| 10 mM | 0.1309 mL | 0.6545 mL | 1.3091 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
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