Cy3 NHS ester
(Synonyms: Cyanine3 NHS ester) 目录号 : GC17345
Cy3 NHS ester是一种含花青（Cyanine）的荧光染料，常用于蛋白、抗体以及小分子化合物的标记，最大激发/发射波长分别为550/570nm。
Cas No.:1393363-07-9
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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Cy3 NHS ester is a cyanine-containing fluorescent dye commonly used for labeling proteins, antibodies and small molecules, with maximum excitation/emission wavelengths of 550/570nm respectively[1, 2]. Cy3 NHS ester is a high-quality active fluorescent dye optimized for amine labeling. Cy3 dye provides a bright orange signal[1]. Cy3 NHS ester can covalently bind to the primary amine groups (such as lysine) of biological molecules (such as proteins, antibodies, and peptides) through the N-hydroxysuccinimide ester (NHS) group to form a stable amide bond, which is suitable for fluorescent labeling, live cell imaging and molecular detection[3, 4]. The optimal molar ratio of CY dye to protein is about 10:1[5]. The molecular weight of this product is 735.80. It is for research purposes only and is not suitable for food, drugs, medical devices or cosmetics.
References:
[1] Chaudhuri P. AA-Dutp-Cy3 a novel fluorescent labeling agent for nucleotides[J]. Biochemical Pharmacology, 2014, 3: 1000137.
[2] Shan H, Wang N, Gao X, et al. Fluorescent α-Conotoxin [Q1G, ΔR14] LvIB Identifies the Distribution of α7 Nicotinic Acetylcholine Receptor in the Rat Brain[J]. Marine Drugs, 2024, 22(5): 200.
[3] Kang M S, Kong T W S, Khoo J Y X, et al. Recent developments in chemical conjugation strategies targeting native amino acids in proteins and their applications in antibody–drug conjugates[J]. Chemical Science, 2021, 12(41): 13613-13647.
[4] Li Y, Zhou Y, Yue X, et al. Cyanine conjugate‐based biomedical imaging probes[J]. Advanced Healthcare Materials, 2020, 9(22): 2001327.
[5] Pretzer E, Wiktorowicz J E. Saturation fluorescence labeling of proteins for proteomic analyses[J]. Analytical Biochemistry, 2008, 374(2): 250-262.
Cy3 NHS ester是一种含花青（Cyanine）的荧光染料，常用于蛋白、抗体以及小分子化合物的标记，最大激发/发射波长分别为550/570nm[1, 2]。Cy3 NHS ester是针对胺标记优化的高质量活性荧光染料，Cy3染料提供明亮的橙色信号[1]。Cy3 NHS ester能够通过N-羟基琥珀酰亚胺酯（NHS）基团与生物分子（如蛋白质、抗体、多肽）的伯胺基团（如赖氨酸）共价结合，形成稳定的酰胺键，适用于荧光标记、活细胞成像及分子检测[3, 4]。CY染料与蛋白的最佳摩尔比为10:1左右[5]。本产品分子量为735.80，仅供研究用途，不适用于食品、药品、医疗器械或化妆品。
本方案仅提供一个指导，请根据您的具体需要进行修改。
1. 溶液制备
（1）储存液:用DMSO溶解Cy3 NHS ester，配置浓度为10mg/mL的储存液。
注意：未使用的储存液分装后在-20℃或-80°C避光保存，避免反复冻融。
（2）工作液:用实验缓冲液稀释储存液，以达到所需的工作浓度。
注意：请根据实际情况调整工作液浓度，现用现配。
1. 使用Cy3 NHS ester标记anti-GST多克隆抗体
市场上买到的抗体如果含有其它蛋白（例如serum albumin或gelatin等）或带氨基的缓冲液会影响标记，在标记前需纯化。
（1）在1L 0.15M NaCl溶液中透析anti-GST抗体（浓度为0.5mL at 3mg/mL），常温透析4h。在4°C避光再次透析过夜。
（2）第二天用1L 0.1M NaHCO3（pH 8.3）透析4h。
（3）用0.22μm注射器过滤头过滤抗体溶液。用0.1M NaHCO3稀释少量的抗体，在280nm处测其紫外吸收值计算标记抗体的总量。
（4）用DMSO配置Cy3 NHS ester溶液，浓度为10mg/mL。计算所需体积以得到想要的Cy3 NHS ester和抗体的比值（例如20:1），然后慢慢将其加入到抗体溶液中，同时在暗处常温缓慢搅拌45min。
（5）用1L 0.15M NaCl溶液常温避光透析4h除去未标记上的Cy3。在4°C避光再次透析过夜。
（6）用1L 0.01M PBS/0.01%叠氮化钠溶液常温避光透析4h，在4°C避光再次透析过夜。
（7）用0.22μm注射器过滤头过滤抗体溶液。 用0.01M PBS/0.01%叠氮化钠整数倍稀释标记抗体溶液，测量280nm（蛋白）和552nm（Cy）处的紫外可见吸光度。
（8）产品冷冻干燥成粉末或在0.01M PBS/0.01%叠氮化钠溶液中，-20℃避光储存。
注意：本方案为使用Cy3 NHS ester进行蛋白质标记实验提供了指导。可以根据其他文献和具体实验要求进行调整。操作应在无菌环境中进行，防止污染物干扰反应。避免直接接触反应试剂。
| Cas No. | 1393363-07-9 | SDF | |
| 别名 | Cyanine3 NHS ester | ||
| 化学名 | (2E)-1-[6-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl)oxy-6-oxohexyl]-3,3-dimethyl-2-[(E)-3-(1,3,3-trimethyl-5-sulfonatoindol-1-ium-2-yl)prop-2-enylidene]indole-5-sulfonate | ||
| Canonical SMILES | CC1(C2=C(C=CC(=C2)S(=O)(=O)[O-])[N+](=C1C=CC=C3C(C4=C(N3CCCCCC(=O)ON5C(=O)CCC5=O)C=CC(=C4)S(=O)(=O)[O-])(C)C)C)C | ||
| 分子式 | C34H38N3NaO10S2 | 分子量 | 735.80 |
| 溶解度 | DMSO : 125 mg/mL (211.81 mM; Need ultrasonic) | 储存条件 | Store at -20℃; protected from light |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.3591 mL | 6.7953 mL | 13.5906 mL |
| 5 mM | 0.2718 mL | 1.3591 mL | 2.7181 mL |
| 10 mM | 0.1359 mL | 0.6795 mL | 1.3591 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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