SynaptoRedTM C2
(Synonyms: FM 4-64,FM1-43,SynaptoRedC2,Lipophilic probe,Yeast vacuolar membranes酵母液泡膜,Synaptic vesicle 突触小泡,FM 4-64苯乙烯神经末梢荧光探针) 目录号 : GC14835SynaptoRedTM C2是一种膜选择性红色荧光染料,也是一种亲脂性很强的水溶性苯乙烯染料,能特异性地与细胞膜和内膜细胞器结合产生荧光,激发波长为530-560nm,发射波长为590-650nm。
Cas No.:162112-35-8
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
Quality Control & SDS
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- Purity: >99.00%
- COA (Certificate Of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
本方案仅提供一个指导,请根据您的具体需要进行修改。
1. 溶液配制
(1)储存液:用DMSO或EtOH配置SynaptoRedTM C2储存液,浓度为1-5mM。
注意:未使用的储存液分装后在-20℃或-80°C避光保存,避免反复冻融。
(2)工作液:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS或PBS)稀释储存液,配制浓度为5-20μM的SynaptoRedTM C2工作液。
注意:工作液必须现配现用。工作液终浓度需要根据不同细胞系和实验体系来优化,建议从推荐浓度开始,以10倍范围为区间进行最优浓度的摸索。
2.悬浮细胞染色
(1)悬浮细胞经4°C、1000rpm离心3-5min,弃去上清液。用PBS清洗两次,每次5min。
(2)加入1mL SynaptoRedTM C2工作液,室温避光孵育5-30min,不同的细胞最佳培养时间不同。
(3)孵育结束后,经1000-1500rpm离心5min,去除上清液,加入PBS清洗2-3次,每次5min。
(4)用预温的无血清细胞培养基或PBS重悬细胞。通过荧光显微镜或流式细胞术观察。
3.贴壁细胞染色
(1)在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。
(2)从培养基中移走盖玻片,吸出过量的培养基,将盖玻片放在潮湿的环境中。
(3)从盖玻片的一角加入100μL的SynaptoRedTM C2工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
(4)室温避光孵育5-30min,不同的细胞最佳培养时间不同。
(5)吸弃染料工作液,用培养液洗盖玻片2-3次。通过荧光显微镜观察。
注意事项:荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
SynaptoRedTM C2 is a membrane-selective red fluorescent dye and a highly lipophilic water-soluble styrene dye that can specifically bind to cell membranes and endomembranous organelles to produce fluorescence with an excitation wavelength of 530-560nm and an emission wavelength of 590-650nm[1, 2]. SynaptoRedTM C2 can be used as a marker for endocytic and exocytic membrane structures and is also used to track synaptic activity by staining synaptic vesicles at synapses or neuromuscular junctions[3]. SynaptoRedTM C2 can be used to stain bacteria (Gram-positive or Gram-negative) and yeast, but is rapidly internalized into the vacuole membrane in yeast[4, 5].
References:
[1] Betz W J, Mao F, Bewick G S. Activity-dependent fluorescent staining and destaining of living vertebrate motor nerve terminals[J]. Journal of Neuroscience, 1992, 12(2): 363-375.
[2] Kang S Y, Pokhrel A, Bratsch S, et al. Engineering Bacillus subtilis for the formation of a durable living biocomposite material[J]. Nature communications, 2021, 12(1): 7133.
[3] Fischer‐Parton S, Parton R M, Hickey P C, et al. Confocal microscopy of FM4‐64 as a tool for analysing endocytosis and vesicle trafficking in living fungal hyphae[J]. Journal of microscopy, 2000, 198(3): 246-259.
[4] Wang H Y, Hua X W, Jia H R, et al. Universal cell surface imaging for mammalian, fungal, and bacterial cells[J]. ACS Biomaterials Science & Engineering, 2016, 2(6): 987-997.
[5] Fischer‐Parton S, Parton R M, Hickey P C, et al. Confocal microscopy of FM4‐64 as a tool for analysing endocytosis and vesicle trafficking in living fungal hyphae[J]. Journal of microscopy, 2000, 198(3): 246-259.
SynaptoRedTM C2是一种膜选择性红色荧光染料,也是一种亲脂性很强的水溶性苯乙烯染料,能特异性地与细胞膜和内膜细胞器结合产生荧光,激发波长为530-560nm,发射波长为590-650nm[1, 2]。SynaptoRedTM C2能够作为内吞和外切膜结构标志物,也被用于通过在突触或神经肌肉接头处染色突触囊泡来跟踪突触活性[3]。SynaptoRedTM C2可用于细菌(革兰氏阳性或革兰氏阴性)和酵母染色,但在酵母中被迅速内化为液泡膜[4, 5]。
Cas No. | 162112-35-8 | SDF | |
别名 | FM 4-64,FM1-43,SynaptoRedC2,Lipophilic probe,Yeast vacuolar membranes酵母液泡膜,Synaptic vesicle 突触小泡,FM 4-64苯乙烯神经末梢荧光探针 | ||
化学名 | 4-((1E,3E,5E)-6-(4-(diethylamino)phenyl)hexa-1,3,5-trien-1-yl)-1-(3-(triethylammonio)propyl)pyridin-1-ium bromide | ||
Canonical SMILES | CC[N+](CC)(CC)CCC[N+]1=CC=C(/C=C/C=C/C=C/C2=CC=C(C=C2)N(CC)CC)C=C1.[Br-].[Br-] | ||
分子式 | C30H45Br2N3 | 分子量 | 607.51 |
溶解度 | DMSO : 50 mg/mL (82.30 mM; Need ultrasonic) | 储存条件 | Store at -20°C |
General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限:-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度,请将管子加热至37℃,然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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Shipping Condition | 评估样品解决方案:配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸:配备RT,或根据请求配备蓝冰。 |
制备储备液 | |||
1 mg | 5 mg | 10 mg | |
1 mM | 1.6461 mL | 8.2303 mL | 16.4606 mL |
5 mM | 0.3292 mL | 1.6461 mL | 3.2921 mL |
10 mM | 0.1646 mL | 0.823 mL | 1.6461 mL |
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量) | ||||||||||
给药剂量 | mg/kg | 动物平均体重 | g | 每只动物给药体积 | ul | 动物数量 | 只 | |||
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方) | ||||||||||
% DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
计算重置 |
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL saline,混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的;
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。