TMA-DPH
(Synonyms: TMA-DPH(疏水膜荧光探针),N,N,N-Trimethyl-4-(6-phenyl-1,3,5-hexatrien-1-yl)phenylammonium (p-toluenesulfonate)) 目录号 : GC45058
A fluorescent probe
Cas No.:115534-33-3
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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TMA-DPH is a fluorescent probe used for measuring membrane fluidity in artificial and living membrane systems.[1],[2],[3],[4] The cylindrical shape of TMA-DPH confers high sensitivity to reorientation resulting from changes in surrounding lipids. TMA-DPH has excitation and emission maxima at 355 and 430 nm, respectively.
Reference:
[1]. Subramanian, V., Knight, J.S., Parelkar, S., et al. Design, synthesis, and biological evaluation of tetrazole analogs of cl-amidine as protein arginine deiminase inhibitors. Journal of Medicinal Chemistry 58(3), 1337-1344 (2015).
[2]. Illinger, D., and Kurhy, J.G. The kinetic aspects of intracellular fluorescence labeling with TMA-DPH support the maturation model for endocytosis in L929 cells. Journal of Cell Biology 125(4), 783-794 (1994).
[3]. Illinger, D., Duportail, G., Mely, Y., et al. A comparison of the fluorescence properties of TMA-DPH as a probe for plasma membrane and for endocytic membrane. Biochimica et Biophysica Acta 1239(1), 58-66 (1995).
[4]. Chazotte, B. Labeling the plasma membrane with TMA-DPH. Cold Spring Harb.Protoc. 2011(5), (2011).).
本方案仅提供一个指导，请根据您的具体需要进行修改。
1.染色液的制备
建议使用DMSO溶解粉末，溶解浓度为1~5mM，随后使用合适的缓冲液(如:无血清培养基，HBSS或PBS)稀释DMSO溶液，配制浓度为0.5~5μM的染料工作液。
注意:
① 该产品在溶液状态下不稳定，建议现用现配，即刻使用。
② 请根据实际情况调整工作液浓度。
2.细胞悬浮染色
（1）悬浮细胞: 经4°C、1000-1500rpm离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次5分钟。
（2）贴壁细胞：弃去培养基，加入胰蛋白酶消化细胞。经4°C、1000-1500rpm离心弃去上清，加入 PBS 洗涤两次，每次5分钟。
（3）使用TMA-DPH工作液重悬细胞（如2μM），室温下避光进行短期孵育(如10s)，而后立即将未洗过的细胞铺板后转移到显微镜下观察。
3.细胞贴壁染色
（1）弃去培养基，使用PBS 洗涤两次，每次5分钟。
（2）细胞质膜染色：细胞在室温下与终浓度为2μM的TMA-DPH工作液进行短期孵育(10s)，然后将未洗过的玻片转移到显微镜下观察。
（3）细胞内化膜标记染色：细胞移至载玻片烧瓶中，根据实验需求，在37℃条件下用终浓度为2μM的TMA-DPH孵育所需的时间。孵育完成后在PBS中轻轻摇动载玻片几秒钟进行洗涤，以消除外周标记。
注意：不同实验最佳孵育时间不同，请根据实验需求自行修改。
4. 荧光检测：TMA-DPH的激发/发射光分别为355/430nm。
注意事项：
① TMA-DPH与细胞接触后会立即融入质膜中，随后在溶酶体和高酸性晚期内涵体中聚集。
② TMA-DPH的荧光寿命在浓度低于2μM时保持恒定，为6.2±0.2 ns；当浓度高于2μM时，会随着浓度的升高而显着降低；当超过5μM时，下降的速率降低。
③ 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
④ 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
References:
[1]. Illinger, D., and Kurhy, J.G. The kinetic aspects of intracellular fluorescence labeling with TMA-DPH support the maturation model for endocytosis in L929 cells. Journal of Cell Biology 125(4), 783-794 (1994).
| Cas No. | 115534-33-3 | SDF | |
| 别名 | TMA-DPH(疏水膜荧光探针),N,N,N-Trimethyl-4-(6-phenyl-1,3,5-hexatrien-1-yl)phenylammonium (p-toluenesulfonate) | ||
| 化学名 | N,N,N-trimethyl-4-(6-phenyl-1,3,5-hexatrien-1-yl)-benzenaminium, 4-methylbenzenesulfonate | ||
| Canonical SMILES | C[N+](C)(C)C1=CC=C(/C=C/C=C/C=C/C2=CC=CC=C2)C=C1.CC3=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C3 | ||
| 分子式 | C21H24N•C7H7O3S | 分子量 | 461.6 |
| 溶解度 | 1mg/mL in methanol, or in DMF , 10mg/mL in DMSO | 储存条件 | Store at -20°C, protect from light,unstable in solution, ready to use. |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.1664 mL | 10.8319 mL | 21.6638 mL |
| 5 mM | 0.4333 mL | 2.1664 mL | 4.3328 mL |
| 10 mM | 0.2166 mL | 1.0832 mL | 2.1664 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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