TO-PRO 1
目录号 : GC64792
TO-PRO 1是一种具有单一阳离子侧链和低碱选择性的绿色荧光染料，与核酸结合后的最大激发/发射光为515/531 nm。
Cas No.:157199-59-2
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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TO-PRO 1 is a monomeric cyanine dye with a single cationic side chain and low base selectivity that is able to enter cells with damaged membranes and bind to nucleic acids, producing bright green fluorescence. In addition, TO-PRO 1 shows excellent staining results for diatoms that are challenging to stain. TO-PRO 1 is almost non-fluorescent when not bound to nucleic acids, but shows strong fluorescence when bound to nucleic acids, with a maximum excitation/emission light of 515/531 nm[1].
TO-PRO 1是一种具有单一阳离子侧链和低碱选择性的单体花菁染料，能够进入膜受损的细胞并与核酸结合，产生明亮的绿色荧光。此外，TO-PRO 1对染色具有挑战性的硅藻表现非常出色的染色效果。TO-PRO 1未结合核酸时几乎不发荧光，但当与核酸结合后表现出强烈荧光，最大激发/发射光为515/531 nm[1]。
References:
[1]. Elena Gorokhova , Lisa Mattsson, Annica M Sundström. A comparison of TO-PRO-1 iodide and 5-CFDA-AM staining methods for assessing viability of planktonic algae with epifluorescence microscopy. 2012 Jun;89(3):216-21. doi: 10.1016/j.mimet.2012.03.005. Epub 2012 Mar 14.
本方案仅提供一个指导，请根据您的具体需要进行修改。
1、配制工作液: 使用合适的缓冲液（如HHBS或PBS）稀释浓度为5 mM的TO-PRO 1贮存液，配置成1-5μM的工作液。
注意:
①首次使用储存液时建议根据单次用量分装成小规格，-20℃或-80℃避光冻存，避免反复冻融；
②建议初次实验时设置染色液浓度梯度，以确定最佳工作浓度；
③高染料浓度可能引起其它细胞结构的非特异染色；
④请根据实际情况调整工作液浓度，现用现配。
2、细胞染色（以6孔板为例）
2.1细胞悬浮染色
（1）悬浮细胞经1000g离心3-5min。弃去上清液，使用PBS清洗两次，每次5分钟。
（2）贴壁细胞使用PBS清洗两次，加入胰酶消化细胞，消化完成后经1000g离心3-5min。
（3）加入1mL经37 °C预热的TO-PRO 1染料工作液重悬细胞，37 °C避光孵育15-60min分钟，不同细胞最佳培养时间不同。
（4）孵育结束后，经1000g离心5分钟，去除上清液，加入PBS清洗2-3次。
（5）使用缓冲液重悬细胞，通过荧光显微镜或流式细胞技术进行观察。
2.2细胞贴壁染色
（1）在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。
（2）从培养基中移走盖玻片，吸出过量的培养基，将盖玻片放在潮湿的环境中。
（3）从盖玻片的一角加入100μL的染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞，37 °C避光孵育15-60min分钟。
（4）吸弃染料工作液，使用培养液洗盖玻片2~3次，通过荧光显微镜进行观察。
3.显微镜检测：TO-PRO 1结合核酸后的最大激发/发射光为515/531 nm
注意事项：
1）荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
References:
[1]. Elena Gorokhova, Lisa Mattsson, Annica M Sundström. A comparison of TO-PRO-1 iodide and 5-CFDA-AM staining methods for assessing viability of planktonic algae with epifluorescence microscopy. 2012 Jun;89(3):216-21. doi: 10.1016/j.mimet.2012.03.005. Epub 2012 Mar 14.
| Cas No. | 157199-59-2 | SDF | Download SDF |
| 分子式 | C24H29I2N3S | 分子量 | 645.38 |
| 溶解度 | 储存条件 | Store at -20°C | |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.5495 mL | 7.7474 mL | 15.4947 mL |
| 5 mM | 0.3099 mL | 1.5495 mL | 3.0989 mL |
| 10 mM | 0.1549 mL | 0.7747 mL | 1.5495 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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