Tris(4,7-diphenyl-1,10-phenanthroline)ruthenium II dichloride complex
(Synonyms: 三（4,7-联苯-1,10-邻菲啰啉）二氯化钌) 目录号 : GC48207
A luminescent oxygen probe
Cas No.:36309-88-3
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00%
- COA (Certificate Of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
本方案仅提供一个指导，请根据您的具体需要进行修改。
1.制备染色液
使用pH 7.4的磷酸盐缓冲液（PBS）溶解粉末，配置浓度为120μM的染料工作液。比如，使用7.127ml PBS溶解1mg Tris(4,7-diphenyl-1,10-phenanthroline) ruthenium II dichloride complex粉末。
注意:本产品含有1,10-phenanthroline，不太稳定，建议现用现配。
2.细胞染色
(1)悬浮细胞：经1000g离心3-5分钟，弃去上清液，使用PBS或其他缓冲液清洗两次，每次5分钟；
(2)贴壁细胞：使用PBS或其他缓冲液清洗两次，加入胰酶消化细胞，消化完成后经1000g离心3-5min；
(3)加入染料工作溶液重悬细胞，将细胞在室温下孵育1小时以允许染料渗透；
注意：
①建议染色过程中每隔5-10min重悬细胞一次，以便充分染色；
② 不同细胞最佳孵育时间不同，请根据具体实验需求自行摸索。
(4)孵育结束后，经1000g离心5分钟，去除染色液，加入PBS或其他缓冲液清洗2-3次，去除残留探针。
3.细胞贴壁染色
(1)在无菌盖玻片上培养贴壁细胞；
(2)从培养基中移走盖玻片，吸出过量的培养基，将盖玻片放在潮湿的环境中；
(3)从盖玻片的一角加入约100-150μL的染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞；
(4) 将细胞在室温下孵育1小时以允许染料渗透；
注意：不同细胞最佳孵育时间不同，请根据具体实验需求自行摸索；
(5)孵育结束后吸弃染料工作液，使用PBS或其他缓冲液清洗盖玻片2~3次。
4.荧光检测：通过荧光显微镜或流式细胞仪对染色结果进行观察。Tris(4,7-diphenyl-1,10-phenanthroline)ruthenium II dichloride complex的最大激发光/发射光波长为455/613nm。
注意事项：
(1)荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
(2)为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
References:
[1]. Jin Ji, Nitsa Rosenzweig, Imanie Jones, Zeev Rosenzweig. Novel fluorescent oxygen indicator for intracellular oxygen measurements. J Biomed Opt. 2002 Jul;7(3):404-9. doi: 10.1117/1.1483082.
Tris(4,7-
1.Kim, H.J., Jeong, Y.C., Rhee, J.I., et al.Synthesis of tris(4,7-diphenyl-1,10-phenanthroline)ruthenium(II) complexes possessing a linker arm for use in sol-gel-based optical oxygen sensorBulletin of the Korean Chemical Society27(12)2084-2086(2006)
2.Lippitsch, M.E.Luminescence quenching behavior of an oxygen sensor based on a Ru(lI) complex dissolved in polystyreneAnalytical Chemistry67(1)88-93(1995)
3.Rumsey, W.L., Vanderkooi, J.M., and Wilson, D.F.Imaging of phosphorescence: A novel method for measuring oxygen distribution in perfused tissueScience241(4873)1649-1651(1988)
4.Liebsch, G., Klimant, I., Frank, B., et al.Luminescence lifetime imaging of oxygen, pH, and carbon dioxide distribution using optical sensorsAppl.Spectrosc.54(4)548-559(2000)
5.Bacon, J.R., and Demas, J.N.Determination of oxygen concentrations by luminescence quenching of a polymer-immobilized transition-metal complexAnalytical Chemistry59(23)2780-2785(1987)
6.Klimant, I., and Wolfbeis, O.S.Oxygen-sensitive luminescent materials based on silicone-soluble ruthenium diimine complexesAnalytical Chemistry67(18)3160-3166(1995)
| Cas No. | 36309-88-3 | SDF | |
| 别名 | 三（4,7-联苯-1,10-邻菲啰啉）二氯化钌 | ||
| Canonical SMILES | [N]1(C=CC(C2=CC=CC=C2)=C3C=C4)=C3C5=C4C(C6=CC=CC=C6)=CC=[N]5[Ru+2]178([N](C=CC(C9=CC=CC=C9)=C%10C=C%11)=C%10C%12=C%11C(C%13=CC=CC=C%13)=CC=[N]8%12)[N]%14=CC=C(C%15=CC=CC=C%15)C%16=C%14C%17=[N]7C=CC(C%18=CC=CC=C%18)=C%17C=C%16.[Cl-].[Cl-] | ||
| 分子式 | C72H48N6Ru.2Cl | 分子量 | 1169.2 |
| 溶解度 | DMF: 25 mg/ml,DMSO: 25 mg/ml,Ethanol: 25 mg/ml,Ethanol:PBS (pH 7.2) (1:3): 0.25 mg/ml | 储存条件 | 4°C, protect from light, stored under nitrogen |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 0.8553 mL | 4.2764 mL | 8.5529 mL |
| 5 mM | 0.1711 mL | 0.8553 mL | 1.7106 mL |
| 10 mM | 0.0855 mL | 0.4276 mL | 0.8553 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。