WSP-5
(Synonyms: Washington State Probe-5) 目录号 : GC45162WSP-5(Washington State Probe-5)是一种含活性二硫化物的荧光探针，特别设计用来快速检测生物样本和细胞内的硫化氢(H2S)。
Cas No.:1593024-78-2
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
WSP-5 (Washington State Probe-5) is a fluorescent probe containing active disulfide groups, specifically designed for rapid detection of hydrogen sulfide (H2S) in biological samples and within cells. H2S, like nitric oxide, has significant effects on mammalian immune, nervous, cardiovascular, and pulmonary systems. Through a reaction-based fluorescence turn-on strategy, WSP-5 selectively and rapidly reacts with H2S, generating fluorescence with excitation and emission maxima at 502 and 525 nm, respectively[1]. Compared with the three H2S probes WSP-1, CAY and P3, WSP-5 has the widest linear range of sensitivity, minimal interference to thiols and other analytes, the most stable in different pH environments, and can be used in Imaging H2S in live cell systems [2].
References:
[1] Peng, B., Chen, W., Liu, C., et al. Fluorescent probes based on nucleophilic substitution-cyclization for hydrogen sulfide detection and bioimaging[J]. Chemistry 20(4), 1010-1016 (2014).
[2] Yingzhu Zhou, Dr. Federico Mazur,et al. Sensitivity and Selectivity Analysis of Fluorescent Probes for Hydrogen Sulfide Detection[J]. Chemistry – An Asian Journal
March 1, 2022.
本方案仅提供一个指导，请根据您的具体需要进行修改。
1.溶液配制
(1)制备储存液：将低温保存的固体平衡至室温，使用DMSO溶解WSP-5，配置浓度为10mM的储存液。
注意:未使用的储存液分装后在-20℃或-80°C避光保存，避免反复冻融。
(2)制备工作液：正式实验前，用合适的缓冲液(如:无血清培养基或PBS)稀释储存液，到所需的工作浓度，如:10-100μM。
注意：最佳的工作浓度请根据实际情况调整或参阅文献自行设置梯度浓度进行摸索。工作液必须现配现用。
2.用WSP-5检测细胞H2S步骤[1](来自文献,仅做参考)
(1) 细胞处理：将2.5×10^5 4T1癌细胞传代培养到24孔板，使其粘附12 h。
(2) WSP-5孵育：将细胞与100 μM WPS-5 探针一起孵育30min。
(3) Na2S处理：用200 μM Na2S处理细胞。
(4) 荧光检测：10 min后，使用激光扫描共聚焦显微镜获取荧光图像。λ ex/em =502/525 nm.
3. 分析获得的荧光强度数据以评估 WSP-5 对 H2S的敏感性步骤[2](来自文献,仅做参考)
(1) 实验准备：使用黑色透明底 96 孔板进行实验。每个孔中准备最终体积 200 μL。准备含有 1 mM CTAB 的 PBS 作为所有实验的缓冲液。
(2) 探针溶解：将 WSP-5 探针溶解在含有 1 mM CTAB 的 PBS 中，终浓度为 10 μM。
(3) H2S供体添加：将浓度不断增加的 Na2S 或 DAT作为 H2S 供体添加到含有 WSP-5 探针的孔中。浓度范围为 0 至 10,000 μM。
(4) 荧光测量：使用 SpectraMax M5 酶标仪定期（例如每 30 秒）测量荧光强度。λex/em=502/525 nm。
(5) 数据采集：记录 30 分钟内的荧光强度测量值。
注意：该实验方案为使用WSP-5检测细胞H2S和随后的荧光测量提供指导。可以根据具体实验要求进行调整。
| Cas No. | 1593024-78-2 | SDF | |
| 别名 | Washington State Probe-5 | ||
| 化学名 | 3-oxo-3H-spiro[isobenzofuran-1,9'-xanthene]-3',6'-diyl bis(2-(pyridin-2-yldisulfanyl)benzoate) | ||
| Canonical SMILES | O=C(OC1=CC=C2C(OC3=C(C24C5=CC=CC=C5C(O4)=O)C=CC(OC(C6=CC=CC=C6SSC7=CC=CC=N7)=O)=C3)=C1)C8=C(SSC9=NC=CC=C9)C=CC=C8 | ||
| 分子式 | C44H26N2O7S4 | 分子量 | 822.9 |
| 溶解度 | 25 mg/ml in DMSO, 30 mg/ml in DMF | 储存条件 | Store at -20°C; protect from light |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.2152 mL | 6.0761 mL | 12.1521 mL |
| 5 mM | 0.243 mL | 1.2152 mL | 2.4304 mL |
| 10 mM | 0.1215 mL | 0.6076 mL | 1.2152 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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